復方絞股藍益智顆粒藥劑學及其防治老年性癡呆的藥理作用與安全性研究.pdf

1、目的：本文研究復方絞股藍益智顆粒（FTG）的提取工藝、質(zhì)量標準及其防治老年性癡呆的藥理作用和安全性，為將FTG開發(fā)成新一代功能保健食品提供科學依據(jù)。
　　方法：①藥劑學研究：以總皂苷的得率為指標，運用正交試驗優(yōu)選FTG最佳提取工藝；用TLC法對制劑中三七、人參進行定性鑒別，用分光光度法測定制劑中總皂苷含量。②藥理學研究：采用經(jīng)典的小鼠跳臺實驗與大鼠Morris水迷宮實驗，觀察FTG對動物學習記憶障礙的改善作用；采用以尾靜脈注射膠原

2、蛋白與腎上腺素的混合誘導劑，復制小鼠急性腦卒中模型，觀察FTG對小鼠急性腦卒中死亡率的影響；培養(yǎng)原代大鼠海馬神經(jīng)細胞，觀察FTG對Aβ25-35致神經(jīng)細胞毒性的保護作用；測定FTG對小鼠腦蛋白含量及MAO-B活性的影響與FTG對Aβ25-35致癡呆大鼠海馬Ac hE活性的影響。③毒理學研究：在急性經(jīng)口毒性試驗中，采用最大給藥量試驗法，以30000 mg/kg BW劑量的FTG給予小鼠灌胃兩周，觀察小鼠一般外觀表現(xiàn)，中毒癥狀與死亡數(shù)；采用

3、Ames試驗、小鼠骨髓微核試驗、小鼠精子畸形試驗，觀察 FTG的遺傳毒性；在30天喂養(yǎng)試驗中，以3333、5000、6667 mg/kg BW3個劑量的FTG給大鼠連續(xù)灌胃30天，實驗期間觀察動物的生長發(fā)育情況，包括各劑量組的動物體重、增重量、進食量、食物利用率、血常規(guī)指標、血生化指標、臟器重量及臟器/體重比值。
　　結(jié)果：①藥劑學研究：優(yōu)選出FTG最佳提取工藝為A2C3B2：即微波提取3次，加水量為10倍量，每次提取時間為30分

4、鐘；在TLC法鑒別實驗中，供試品與對照品的色譜在相應(yīng)位臵上顯示相同顏色的斑點，陰性無干擾。人參皂苷 Re在40μg～200μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，Y=250.83X-0.017，r=0.9972，精密度和回收率符合要求。②藥理學研究：在小鼠跳臺試驗中觀察到FTG高、中、低（16、8、4g〃kg-1〃d-1）劑量組與模型組比較，記憶獲得期成績： P＜0.05或 P＜0.01，差異有統(tǒng)計學意義，記憶鞏固期成績：各組P﹥0.05，差異無統(tǒng)計學

5、意義；在大鼠水迷宮實驗中觀察到 FTG高、中、低（14、7、3.5g〃kg-1〃d-1）劑量組逃避潛伏期、成功找到平臺次數(shù)與模型組比較P＜0.05或P＜0.01，差異有統(tǒng)計學意義；在急性腦卒中實驗中察到FTG高、中、低（16、8、4g〃kg-1〃d-1）劑量組死亡率與模型組比較，P＜0.05或P＜0.01，差異有統(tǒng)計學意義；在大鼠海馬神經(jīng)細胞實驗中觀察到 FTG(2.5mg-1〃mL-1)組與模型組比較細胞存活率顯著升高（P<0.05）

6、，差異有統(tǒng)計學意義；在測定 MAO-B實驗中觀察到FTG高、中、低（16、8、4g〃kg-1〃d-1）劑量組的腦蛋白含量與MAO-B活性與空白組比較P＜0.05或P＜0.01，差異有統(tǒng)計學意義；在測定大鼠海馬AchE活性實驗中觀察到FTG高、中、低（14、7、3.5g〃kg-1〃d-1）劑量組AchE活性與假手術(shù)組比較P＜0.01，差異有統(tǒng)計學意義。③毒理學研究：在急性經(jīng)口毒性試驗中，未見動物有中毒癥狀，無動物死亡，外觀表現(xiàn)未見異常；在

7、遺傳毒性試驗中，三項遺傳毒性試驗結(jié)果均為陰性；在30天喂養(yǎng)試驗中，實驗期間動物的生長發(fā)育良好，各劑量組的動物體重、增重量、進食量、食物利用率、血常規(guī)指標、血生化指標、臟器重量及臟器/體重比值與對照組比較，均無顯著性差異（P>0.05）。
　　結(jié)論：①FTG的最佳提取工藝為A2C3B2（即微波提取3次，水用量為10倍量），并建立了其質(zhì)量標準。②FTG對大、小鼠學習記憶障礙具有明顯的改善作用；對小鼠急性腦卒中死亡率有明顯降低作用；FT