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1、DevelopmentofSNPMarkersinMultipleContinuousBackcrosSPopulationandAssociationAnalysiSofSNPMar’kerswithStarchCharacters(躉ngdaoAgriculturalUniversityInFulfillmentoftheRequirementfortheDegreeof—MasterofScienceZhangShasha(Col
2、legeofLifeScience)Supervisor:SongXiyunQingdaoChinaJune,2013青島農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士論文摘要基于糯玉米高世代群體的SNP標(biāo)記開發(fā)及其與淀粉性狀的關(guān)聯(lián)分析摘要本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)多年來構(gòu)建成功的糯玉米高世代群體(H21BC5F2)進(jìn)行單核苷酸多態(tài)性(SNP)及遺傳突變與表型之間的相關(guān)性進(jìn)行分析,建立基于單核苷酸多態(tài)性的高支鏈淀粉糯玉米優(yōu)良種質(zhì)快速高效篩選的輔助育種技術(shù)體系,確定與淀粉合成相關(guān)基因的
3、全長序列,分析目標(biāo)基因在親本與后代、糯與普通玉米序列間的異同點(diǎn),并進(jìn)行性狀與基因間的關(guān)聯(lián)分析,闡明主效基因?qū)τ衩卓偟矸?、直、支淀粉合成等方面的調(diào)控機(jī)理。1本實(shí)驗(yàn)針對(duì)玉米淀粉合成相關(guān)的基因aesh2,bt2,“dul,sul,WX,sus]分別設(shè)計(jì)了94對(duì)引物,提取玉米自交系H21和紫糯96619的基因組DNA后進(jìn)行PCR擴(kuò)增,擴(kuò)增片段測序并拼接出候選基因的全長序列。其中ae基因的全長為19797bp,sh2基因的全長為8413bp,bt
4、2基因的全長為5964bp,du『基因的全長為11461bpWX基因的全長為3249bp,sul基因的全長為8450bp,susl基因的全長為8726bp。2針對(duì)susl基因進(jìn)行親本之間的序列比對(duì),找到了120個(gè)SNP位點(diǎn)(包含外顯子與內(nèi)含子),綜合其翻譯出的氨基酸序列的差異在SNP附近設(shè)計(jì)引物,用于擴(kuò)增H21BCsF2中的目的片段,通過RotorGeneQ(QIAGEN)高分辨率熔解曲線(HRM),對(duì)高世代回交群體各個(gè)SNP位點(diǎn)進(jìn)行分
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