丹參制劑及桑白皮的抗氧化藥效評(píng)價(jià).pdf

1、自由基醫(yī)學(xué)理論認(rèn)為疾病的發(fā)生是自由基過(guò)剩引起的,它為人們對(duì)發(fā)病的機(jī)理和疾病的認(rèn)識(shí)開(kāi)辟了一條新的道路,這對(duì)于目前難以攻克疾病的治療新方法的探討具有重要指導(dǎo)意義。因此研究具有高度抗氧化活性的抗氧化劑和開(kāi)發(fā)針對(duì)自由基失衡問(wèn)題的抗氧化新藥物具有重大意義。過(guò)去對(duì)于藥物好壞評(píng)價(jià)的傳統(tǒng)方法是看藥物中含有某一種或某一類有效成分的多少。但是對(duì)于像抗氧化類中藥和中藥制劑而言,藥物抗氧化效果與其中有效成分含量不一定是正相關(guān),且各成分間相互作用復(fù)雜,導(dǎo)致該方法

2、不能準(zhǔn)確反映藥物的實(shí)際治療效果。
　　本文在自由基醫(yī)學(xué)的理論基礎(chǔ)上,結(jié)合藥物藥效評(píng)價(jià)理論,針對(duì)治療氧化損傷類疾病的藥物,提出基于抗氧化效果的藥效評(píng)價(jià)的新觀點(diǎn)。
　　論文分兩個(gè)部分,第一部分是方法學(xué)研究,建立3種基于自由基清除能力的抗氧化評(píng)價(jià)體系并對(duì)各種實(shí)驗(yàn)參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化。第二部分是方法的應(yīng)用研究,將方法應(yīng)用于藥物體系的評(píng)價(jià),站在抗氧化角度,對(duì)8種丹參類上市藥物和2種中藥提取物進(jìn)行評(píng)價(jià)。
　　3種抗氧化評(píng)價(jià)方法分別為:紫外

3、檢測(cè)DPPH法;采用流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光檢測(cè)H2O2-Fe2+- Luminol的·OH法、鄰苯三酚-Luminol-碳酸鹽的·O2-法。通過(guò)單因素變量法優(yōu)化了實(shí)驗(yàn)參數(shù)并對(duì)優(yōu)化后方法的穩(wěn)定性和精密度進(jìn)行了考察,證明三種方法穩(wěn)定性好精密度高方法準(zhǔn)確可靠,可應(yīng)用于對(duì)藥物體系的抗氧化評(píng)價(jià)。藥物的抗氧化活性可以通過(guò)它們對(duì)3種自由基的清除能力間接預(yù)測(cè),利用自由基清除率與濃度的劑量依賴關(guān)系可以求出 IC50值。以 IC50值為評(píng)價(jià)指標(biāo)可以科學(xué)地表示藥物

4、自由基清除能力,從而反應(yīng)其抗氧化活性。
　　選擇能力治療心腦血管疾病的8種丹參藥物為研究對(duì)象,對(duì)其抗氧化治療功效進(jìn)行了評(píng)價(jià)。結(jié)果顯示3種方法評(píng)價(jià)結(jié)果差異大,可比性不大,測(cè)定結(jié)果僅能代表各自體系自由基清除能力,單一方法很難準(zhǔn)確評(píng)價(jià)藥物抗氧化能力。結(jié)果證明多方法多角度綜合評(píng)價(jià)的必要性,也說(shuō)明急需建立標(biāo)準(zhǔn)化評(píng)價(jià)機(jī)制的緊迫性。
　　以桑白皮為研究對(duì)象,采用水提醇沉法提取多糖,并采用正交試驗(yàn)考察了桑白皮多糖的提取工藝,獲得了最佳提取條

5、件為:加水倍數(shù)20倍、超聲時(shí)間30 min、提取溫度50℃、提取次數(shù)2次。并對(duì)最優(yōu)方案進(jìn)行驗(yàn)證,提取樣品200 g得到多糖12.59 g,提取率6.30％,結(jié)果令人滿意。用硫酸苯酚法測(cè)定總糖含量,DNS比色法測(cè)定還原糖含量,兩者之差表示多糖含量。以Vc作為參照評(píng)價(jià)多糖抗氧化活性,3種自由基清除實(shí)驗(yàn)表明桑白皮多糖對(duì)DPPH和·OH清除作用與質(zhì)量濃度劑量相關(guān),結(jié)果顯示桑白皮多糖對(duì)DPPH自由基和·OH具有一定的抗氧化活性,但不及 Vc。并發(fā)

6、現(xiàn)桑白皮多糖對(duì)鄰苯三酚自氧化產(chǎn)生的超氧陰離子促 luminol發(fā)光體系具有增敏作用。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)該增敏作用與多糖質(zhì)量濃度成線性相關(guān)。該發(fā)現(xiàn)有望發(fā)展為多糖的含量測(cè)定提供新方法等,具有廣泛應(yīng)用前景和潛在利用價(jià)值。
　　采用95％乙醇浸提桑白皮黃酮,AB-8大孔吸附樹(shù)脂富集純化黃酮粗提物,紫外分光光度法測(cè)定其含量,并考察其抗氧化活性。結(jié)果顯示大孔吸附樹(shù)脂處理后的桑白皮黃酮含量可達(dá)51％以上。同樣以Vc作為陽(yáng)性對(duì)照測(cè)定了桑白皮黃酮對(duì)三種