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文檔簡介
1、目的:建立桑白皮性味物質(zhì)基礎的拆分方法,對各個拆分組分建立特征圖譜,驗證各性味拆分組分的互不交叉性,從而為中藥性味可拆分性和可組合性的研究思路和中藥性味科學內(nèi)涵新假說的研究奠定基礎。
方法:(1)采用紫外分光光度法和高效液相色譜法分別測定桑白皮總黃酮和指標性成分桑酮 G的含量,以提取量為考察指標,采用正交設計法優(yōu)化水煎煮提取工藝。(2)采用高效液相法建立桑白皮水煎液HPLC特征圖譜,并對桑酮 G、桑辛素、桑皮苷 A、桑色素和桑
2、根酮 D進行了峰指認。色譜條件如下,色譜柱:PLATISIL(TM)ODS C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流動相:甲醇作為有機相,水相選用0.1%磷酸水溶液進行梯度洗脫;洗脫梯度Min:0-60-90-100,CH3OH%:0-56-100-100;檢測波長:280nm;柱溫:30℃;流速:1.0mL/min。(3)根據(jù)桑白皮的化學成分,采用水蒸氣蒸餾、萃取、醇沉、大孔吸附樹脂等技術,建立桑白皮性味物質(zhì)基礎的拆分方法。并運
3、用 GC-MS、HPLC色譜法以及化學計量法對各性味拆分組分進行的相互驗證研究。
結(jié)果:(1)以總黃酮提取量為考察指標時,其優(yōu)選工藝為A3B3C2;以桑酮G提取量為考察指標時,其優(yōu)選工藝為A2-3B1-3C1-3,結(jié)合工業(yè)化大生產(chǎn)的需要,最終確定桑白皮水煎煮最佳提取工藝為A3B3C2,即藥材煎煮3次,每次1小時,加水10倍量。(2)建立了桑白皮水煎液HPLC特征圖譜,并對桑酮G、桑辛素、桑皮苷A、桑色素和桑根酮D進行了峰指認。
4、通過精密度、穩(wěn)定性、重現(xiàn)性等方法學考察,相對保留時間和相對峰面積RSD值均小于3%。(3)桑白皮的全成分拆分為5個組分:即30%乙醇洗脫組分、50%乙醇洗脫組分、80%乙醇洗脫組分、醇沉組分和脂肪油組分。其中30%、50%、80%乙醇洗脫組分經(jīng)HPLC-PDA、HPLC-ELSD、UPLC-DAD檢識以及聚類分析法、主成分分析法和正交偏最小二乘法分析,最終確定30%、50%、80%乙醇洗脫組分基本無化學成分交叉。桑白皮脂肪油組分采用GC
5、-MS分析,檢測出38個組分,利用MS結(jié)合保留指數(shù)定性,鑒定出其中27個成分,其相對含量總和占總檢出化合物的93.79%。含量較高的組分為:角鯊烷(50.40%)、α-香樹脂素(10.86%)、亞油酸甲酯(9.33%)、β-棕櫚酸甲酯(3.08%)、11-十八烯酸甲酯(1.76%)等。
結(jié)論:桑白皮性味物質(zhì)基礎的拆分工藝是穩(wěn)定、可行的。桑白皮性味拆分組分的GC、HPLC特征圖譜可以特征性地反映各性味拆分組分的化學特征。表明桑白
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