同源藥材桑枝、桑白皮功效與物質(zhì)基礎(chǔ)相關(guān)性研究.pdf

1、目的：
　　闡明造成同源藥材（桑枝和桑白皮）功效差異的關(guān)鍵藥效物質(zhì)，為二者質(zhì)量控制和國家標(biāo)準(zhǔn)完善提供科學(xué)依據(jù)，也為合理利用桑源中藥提供證據(jù)。
　　方法：
　　1.采用HPLC技術(shù)對桑不同藥用部位進(jìn)行分析，優(yōu)化色譜條件使化學(xué)成分得到最大化表征，從而盡可能的揭示各不同藥用部位在化學(xué)組成上的異同。
　　2.利用UPLC-QTOF-MS提供的質(zhì)譜信息，結(jié)合課題組前期分離的對照品，對桑枝、桑白皮成分進(jìn)行鑒定，明確桑枝、桑白

2、皮的共性和差異成分。
　　3.對桑枝、桑白皮的主要成分進(jìn)行HPLC定量，并歸納二者差異成分的含量、比例關(guān)系等信息。
　　4.選取代表性的桑枝、桑白皮藥材提取物開展與傳統(tǒng)功效相關(guān)的藥效評價(jià)。針對桑枝和桑白皮都具有抗炎的共同特點(diǎn)，選擇二甲苯致小鼠耳腫脹炎癥動物模型評價(jià)二者抗炎作用。以小鼠氨水誘咳試驗(yàn)評價(jià)桑白皮的平喘作用。
　　5.將化學(xué)信息和藥效信息相對應(yīng)，利用化學(xué)計(jì)量學(xué)手段，分析主要成分、差異成分與功效的相關(guān)性。

3、　　結(jié)果：
　　1.建立了桑不同藥用部位的HPLC指紋圖譜及共有模式圖，桑白皮共有峰10個(gè)，桑枝共有峰11個(gè)，桑葉共有峰12個(gè)，桑椹共有峰8個(gè)?；趯φ掌繁葘蚒PLC-QTOF/MS提供的精確相對分子量對10個(gè)特征峰進(jìn)行了指認(rèn)。
　　2.采用UPLC-QTOF/MS技術(shù)，根據(jù)化合物的精確相對分子量，桑枝桑白皮共標(biāo)定了147個(gè)峰，其中二者共有35個(gè)，桑白皮特有55個(gè)，桑枝特有57個(gè)；結(jié)合二級質(zhì)譜裂解信息對桑枝、桑白皮成分進(jìn)行

4、推測，鑒定了39個(gè)化合物，二苯乙烯類16個(gè)，2-芳基苯并呋喃類4個(gè)，香豆素類化合物4個(gè)，黃酮類10個(gè)，Diels-Alder型加合物3個(gè)，酚酸類1個(gè)，生物堿1個(gè)。
　　3.建立了桑枝、桑白皮中5種主要成分的HPLC含量測定方法，對53批桑白皮和54批桑枝藥材進(jìn)行測定。桑白皮的指標(biāo)成分為桑皮苷A、氧化白藜蘆醇、桑酮G、桑酮H、桑辛素；桑枝的指標(biāo)成分為桑皮苷A、氧化白藜蘆醇、桑酮G、柘樹黃酮C、桑辛素。明確了桑枝、桑白皮的共性成分及專

5、屬性成分以及它們在多批次藥材中的含量。同時(shí)，對桑白皮產(chǎn)地加工過程中去皮的合理性進(jìn)行分析。
　　4.二甲苯致小鼠耳腫脹試驗(yàn)中，桑白皮高劑量（9.6 g/kg），低劑量（2.4 g/kg）及桑枝高劑量（12 g/kg）組小鼠耳腫脹度均明顯降低，結(jié)果具有顯著性差異(P<0.05或P<0.01)；小鼠氨水誘咳實(shí)驗(yàn)中，桑白皮高、低劑量組都可以減少咳嗽小鼠的咳嗽次數(shù)，與模型對照組相比，結(jié)果有顯著性差異（咳嗽潛伏期P<0.01，咳嗽次數(shù)P<0.

6、001；咳嗽潛伏期P<0.05，咳嗽次數(shù)P<0.01）。桑枝高、低劑量與模型對照組相比均無顯著性差異。
　　5.桑枝、桑白皮均有抗炎作用，可能是二苯乙烯類（桑皮苷A）和黃酮類（桑酮G、桑酮H、柘樹黃酮C、桑辛素等）成分共同作用的結(jié)果；桑白皮的止咳作用可能與其桑皮苷A的含量較高有關(guān)。
　　6.綜述了桑枝、桑白皮化學(xué)成分、藥理活性及質(zhì)量評價(jià)研究進(jìn)展。
　　結(jié)論：
　　通過多批次藥材的定性定量比較，基本明確了桑枝、桑白

7、皮化學(xué)成分的共性和差異性。桑皮苷A、氧化白藜蘆醇、桑酮G、和桑辛素4個(gè)成分為桑枝、桑白皮所共有，但成分的含量和比例差異非常大。桑酮H為桑白皮的特有成分，柘樹黃酮C為桑枝的特有成分。另外，對桑白皮產(chǎn)地加工過程中去皮的合理性進(jìn)行分析。
　　藥效實(shí)驗(yàn)表明，桑枝、桑白皮均有抗炎作用，可能是二苯乙烯類和黃酮類成分共同作用的結(jié)果；桑白皮的止咳作用可能與其桑皮苷A的含量較高有關(guān)。研究結(jié)果可為桑枝、桑白皮的質(zhì)量控制和國家標(biāo)準(zhǔn)完善提供參考數(shù)據(jù)和建議