基于物質(zhì)基礎(chǔ)和生物活性對半夏及其炮制品功效的相關(guān)性研究.pdf

1、半夏為天南星科植物半夏 Pinellia ternata（Thunb.）Breit的干燥塊莖，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，其生品有小毒，列為下品。半夏性溫，具有燥濕化痰、降逆止嘔、消痞散結(jié)之功；因其味辛辣，麻舌刺喉，故生品一般不內(nèi)服，臨床多炮制后應(yīng)用。常用的炮制品有清半夏、姜半夏、法半夏、京半夏，前三者為2010年版《中國藥典》一部所收載。半夏炮制品種類繁多，不同炮制品炮制方法不同，必然對其化學(xué)成分及功效產(chǎn)生影響，這一直是困擾半夏及其炮制品質(zhì)

2、量的難題，目前尚缺乏行之有效的質(zhì)量控制方法。
　　本文從化學(xué)成分、藥效學(xué)及生物活性三個方面對半夏及其炮制品清半夏、姜半夏、法半夏、京半夏進行了系統(tǒng)的研究，揭示了半夏炮制前后有效成分的變化及其對功效（藥理活性）及生物活性的影響，闡明了有效成分與功效（藥理活性）、生物活性之間的相關(guān)性，總有機酸止咳活性、總生物堿抗炎活性可作為半夏及其炮制品的質(zhì)量評價指標；同時建立了生物活性、特征指紋圖譜及有效成分含量相結(jié)合共同評價半夏及其炮制品質(zhì)量的方

3、法，為完善其質(zhì)量標準，構(gòu)建全方位、多元化的中藥質(zhì)量控制模式提出新的思路。主要研究結(jié)果如下：
　　1、半夏及其炮制品的理化分析
　　1.1通過化學(xué)成分的定性、定量分析，闡明了半夏炮制前后有效成分的變化。本文采用電位滴定法、酸性染料比色法對半夏及其炮制品總有機酸、總生物堿進行了含量測定。半夏炮制后，總有機酸含量不同程度地增高，其變化幅度為京半夏+25％、法半夏+20%、清半夏+15%，姜半夏變化較小；總生物堿含量變化幅度為姜半夏

4、+20%、京半夏-12%、法半夏-38%、清半夏-50%。
　　1.2首次建立了半夏及其炮制品不同提取部位（水部位，75%、95%乙醇部位）的特征指紋圖譜，并對其中8個特征峰進行了指認，分別是肌苷、鳥苷、腺苷、琥珀酸、鹽酸麻黃堿、甘草苷、甘草酸銨、6-姜辣素。6-姜辣素為姜半夏獨有特征峰；甘草苷、甘草酸銨為法半夏、京半夏獨有特征峰。此外，與半夏相比，清半夏、姜半夏在18.3min新增1個色譜峰；法半夏、京半夏缺失肌苷，在45.4m

5、in新增1個色譜峰。
　　2、半夏及其炮制品的藥效學(xué)研究
　　2.1本文對半夏及其炮制品的化學(xué)成分進行了藥效學(xué)研究，結(jié)果表明半夏及其炮制品的總有機酸具有止咳作用，總生物堿具有抗炎作用，總酚具有抗氧化作用，三者均為半夏及其炮制品的有效活性成分。
　　2.2半夏及其炮制品總有機酸含量測定結(jié)果及止咳作用研究表明，京半夏、法半夏總有機酸含量最高，止咳作用最強；清半夏、姜半夏總有機酸含量低于前二者，其止咳作用亦較弱；半夏的總有機

6、酸含量最低，止咳作用最弱。在中醫(yī)臨床使用中，因京半夏、法半夏炮制過程中加入了甘草，應(yīng)用中偏重于止咳；清半夏偏于祛痰、降肺氣，止咳作用弱于京半夏、法半夏；姜半夏炮制過程中加入了生姜，偏于降逆止嘔；半夏主要外用，不內(nèi)服。因此，半夏及其炮制品總有機酸與止咳作用存在著密切聯(lián)系，總有機酸含量越高，止咳作用越強，總有機酸止咳作用研究結(jié)果與臨床功效相一致，故2010年版《中國藥典》以總有機酸作為評價半夏及其炮制品質(zhì)量的指標是合理的。
　　2.3

7、中藥的有效成分反映了臨床功效（藥理活性），臨床功效是有效成分的重要表達，二者存在密切的關(guān)系。因此，本文進一步對有效成分與藥理活性進行了相關(guān)性分析，闡明了總有機酸與止咳、總生物堿與抗炎、總酚與抗氧化的關(guān)系，表現(xiàn)為有效成分含量增加，活性增強。
　　2.4首次對半夏及其炮制品的總有機酸止咳進行了“譜-效”關(guān)系研究。半夏及其炮制品總有機酸指紋圖譜中，4號、6號（琥珀酸）、12號色譜峰所代表的化學(xué)成分與止咳活性具有較強的關(guān)聯(lián)度，對止咳活性貢

8、獻最大，特別是4號色譜峰，峰面積大、關(guān)聯(lián)度強，可作為琥珀酸外另一評價半夏及其炮制品質(zhì)量的新指標，但其反映的化學(xué)成分還需進一步的研究。
　　3、半夏及其炮制品的生物活性研究
　　3.1首次建立了半夏及其炮制品總有機酸止咳、總生物堿抗炎的生物效價測定方法。本文以功效（藥理活性）為出發(fā)點，基于小鼠濃氨水引咳模型、足腫脹對炎癥介質(zhì)PGE2影響模型，建立了半夏及其炮制品生物效價測定方法，測定了其效價值。半夏炮制后，止咳效價值均增高，京

9、半夏的止咳效價值最大，為2105.59 U·g-1，其后依次為法半夏、清半夏、姜半夏，半夏止咳效價值最小，為京半夏的1/3倍；炮制后抗炎效價值均降低，半夏抗炎效價值最大，為8.49 U·g-1，其后依次為姜半夏、京半夏、法半夏，清半夏抗炎效價值最小，為半夏的1/4倍。
　　3.2半夏及其炮制品生物效價測定結(jié)果與藥效學(xué)研究表明，京半夏、法半夏總有機酸止咳效價值最大，止咳作用最強；清半夏、姜半夏總有機酸止咳效價值低于前二者，其止咳作用

10、亦較弱；半夏總有機酸止咳效價值最小，止咳作用最弱。因此，生物效價值與藥理活性存在著密切聯(lián)系，總有機酸止咳效價值越大，止咳作用越強，且總有機酸止咳效價測定結(jié)果與臨床功效相一致，總有機酸止咳效價測定法可作為評價半夏及其炮制品質(zhì)量的方法，為其更好的服務(wù)于臨床，保證中藥用藥的安全性、有效性具有重要意義。
　　3.3生物效價反映了藥物的藥理活性信息，有效成分是功效（藥理活性）的基礎(chǔ)，因此本文對生物效價與有效成分進行了相關(guān)性分析，闡明了總有機

11、酸與止咳效價、總生物堿與抗炎效價的關(guān)系，表現(xiàn)為總有機酸含量增高，止咳作用增強，止咳效價值增大，總有機酸含量與止咳效價作用趨勢一致，呈顯著的正相關(guān)；總生物堿含量與抗炎效價作用趨勢基本一致。
　　通過對半夏及其炮制品有效成分與功效（藥理活性）、生物活性之間的相關(guān)性研究表明，半夏及其炮制品的總有機酸止咳活性、總生物堿抗炎活性可作為評價其質(zhì)量的指標；建立的生物活性、特征指紋圖譜及有效成分含量相結(jié)合的方法能夠有效評價半夏及其炮制品的質(zhì)量，可