何首烏不同炮制品成分差異及其與肝細(xì)胞凋亡的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：通過(guò)長(zhǎng)期灌服大鼠何首烏生品及不同炮制品水煎濃縮液，旨在探求何首烏生品及不同炮制品是否具有致肝臟損傷作用，而這種作用隨著炮制方法的不同是否有解除或降低的趨勢(shì)；何首烏生品及不同炮制品導(dǎo)致肝臟損傷的發(fā)生是否與肝細(xì)胞凋亡有關(guān)；分析何首烏中致肝細(xì)胞損傷的物質(zhì)化學(xué)成分。
　　 方法：按照2010版《中國(guó)藥典》和《本草綱目》的方法炮制何首烏，采用高效液相色譜法(HLPC)測(cè)定何首烏生品及不同炮制品水提液和醇提液成分；何首烏生品組及何首烏

2、不同炮制品組分別按劑量灌胃，連續(xù)90d，觀察受試動(dòng)物一般情況、體重、血液生化指標(biāo)及對(duì)大鼠肝臟組織病理組織學(xué)的檢測(cè)，TUNEL技術(shù)檢測(cè)肝組織肝細(xì)胞凋亡。
　　 結(jié)果：(1)何首烏生品及不同炮制品水提物較醇提物均含有少量大黃素，微量大黃素甲醚(除九蒸九曬何首烏未檢測(cè)出)。何首烏生品及不同炮制品水提物中均含有鞣質(zhì)，其中清蒸組含量最高，九蒸九曬組其次。在一定范圍內(nèi)大黃素峰、沒(méi)食子酸峰具有良好的線性、精密度、重復(fù)性和穩(wěn)定性。(2)各給藥組

3、雄性大鼠體重與空白對(duì)照組比較，無(wú)顯著差異。雌性大鼠體重黑豆汁制首烏組與何首烏九蒸九曬組給藥第3周與空白對(duì)照組比較，有明顯差異(P<0.05)；給藥第4周何首烏生品組、清蒸高劑量組、清蒸低劑量組、何首烏九蒸九曬組與空白對(duì)照組比較，有明顯差異(P<0.05)。(3)與空白對(duì)照組比較，何首烏生品組TBIL、IBIL明顯升高(P<0.05)；黑豆汁制首烏組TBIL、IBIL顯著升高(P<0.01)；清蒸低劑量組IBIL明顯升高(P<0.05)，

4、GLO明顯降低(P<0.05)；清蒸高劑量組IBIL顯著升高(P<0.01)；何首烏九蒸九曬組DBIL顯著降低(P<0.01)、IBIL顯著升高(P<0.01)，GLO明顯降低(P<0.05)，ALT、AST明顯升高(P<0.05)。(4)肝臟組織病理切片顯示光鏡下何首烏生品組、清蒸低劑量組病變以肝竇充血為主，黑豆汁制首烏組、清蒸高劑量組、何首烏九蒸九曬組除可見(jiàn)肝竇充血，肝細(xì)胞萎縮偶見(jiàn)點(diǎn)狀壞死，何首烏九蒸九曬組還可見(jiàn)肝細(xì)胞脂肪變性。(5

5、)何首烏生品組、清蒸低劑量組、黑豆汁制首烏組未見(jiàn)明顯細(xì)胞核凋亡，可見(jiàn)肝竇中散在血紅細(xì)胞。清蒸高劑量組、何首烏九蒸九曬組可見(jiàn)細(xì)胞核凋亡。與空白對(duì)照組比較，何首烏清蒸高劑量組大鼠肝組織凋亡指數(shù)明顯增高(P<0.05)；何首烏九蒸九曬組大鼠肝組織凋亡指數(shù)顯著性增高(P<0.01)。
　　 結(jié)論：(1)何首烏生品及不同炮制品中均含有鞣質(zhì)成分和少量大黃素，其中鞣質(zhì)成分清蒸組含量最高，九蒸九曬組其次。表明：何首烏中鞣質(zhì)對(duì)大鼠肝臟具有一定損傷