重組類人膠原蛋白離子交換分離及動力學的研究.pdf

1、本文主要研究重組類人膠原蛋白(HCB)的純化工藝?；蚬こ叹鶨scherichia coliBL21經(jīng)細胞破碎、沉淀、超濾濃縮，得到HCB的粗品，然后再通過離子交換法進一步純化，獲得高純度的類人膠原蛋白。 通過對陽離子交換劑CM-1和CM52兩種樹脂吸附雜蛋白的性能進行了比較，得出CM-1純化后的效果優(yōu)于CM52，CM-1純化類人膠原蛋白的工藝為：進料濃度為4mg·mL<'-1>用pH6.5，NaCl濃度為0.03mol·L<'

2、-1>，20mmol·L<,-1>的磷酸鹽緩沖液配制，吸附時間為1h，在此條件下HCB的純度可達到82.1％，回收率為84.2％。 陰離子交換劑Fractogel EMD DEAE對HCB的吸附平衡研究表明：HCB在FractogelEMD DEAE上的吸附基本符合Langmuir方程；pH、NaCl濃度對Langmuir方程參數(shù)影響較大；pH值對吸附劑吸附性能的影響是復雜的，隨著pH值增加(pH>pI)，吸附容量上升，解離常數(shù)

3、降低，但由于離子交換劑的配基、HCB的性質(zhì)等因素限制，pH值不能太大；隨著NaCl濃度增大，吸附容量減小，解離系數(shù)L<,d>增大；溫度對Langmuir方程參數(shù)的影響較小。 以Fractogel EMD DEAE寸HCB的吸附平衡數(shù)據(jù)為基礎，優(yōu)化了Fractogel EMDDEAE對HCB的純化工藝。離子交換柱層析的操作條件：HCB粗品的起始進樣濃度為4mg·mL<'-1>，以pH8.0，50mmol·L<'-1>的Tris-H