TLR4及NF-kBp65在食管癌組織中的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、食管癌是消化道常見的惡性腫瘤,每年患食管癌死亡人數(shù)約占我國腫瘤死亡人數(shù)的25％,其5年生存率<10％,居癌癥死因第4位。目前對食管癌病因的研究發(fā)現(xiàn)除了吸煙飲酒、微量元素的缺乏、亞硝胺及亞硝酸鹽等因素外,幽門螺旋桿菌(HP)等生物病原體感染引起的持續(xù)性炎癥以及胃酸、膽汁的長期返流造成的慢性損傷對食管癌形成也有著重要影響。大量研究證實長期炎癥刺激與腫瘤的發(fā)生有著密切的關(guān)系,但機(jī)制至今仍未得到明確闡述,推測可能為:當(dāng)機(jī)體遇病原體入侵或損傷修復(fù)

2、時,免疫系統(tǒng)會被激活,進(jìn)而趨化大量炎癥細(xì)胞聚集至損傷部位,后分泌多種細(xì)胞因子(包括炎癥因子、趨化因子、黏附分子)與細(xì)胞外基質(zhì)在局部形成新的微環(huán)境,在此環(huán)境中細(xì)胞因子、趨化因子的持續(xù)存在和由其引發(fā)的級聯(lián)反應(yīng)能夠誘導(dǎo)細(xì)胞增殖,同時炎癥介質(zhì)的長期存在又增加了活性氧產(chǎn)物的產(chǎn)生,導(dǎo)致了DNA氧化損傷,有DNA損傷的增殖細(xì)胞在富含炎癥細(xì)胞和多種生物因子的微環(huán)境中繼續(xù)失控性增殖,最終導(dǎo)致癌變。目前研究發(fā)現(xiàn)TLRs(toll-likereceptors

3、)介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在腫瘤形成過程中起著重要作用。TLRs與相應(yīng)配體結(jié)合后可啟動經(jīng)典的NF-κB信號通路,產(chǎn)生多種細(xì)胞因子,形成適合腫瘤生長的微環(huán)境,促進(jìn)癌癥的發(fā)生發(fā)展。
　　 Toll樣受體是近年來發(fā)現(xiàn)的免疫受體,它通過識別病原體在機(jī)體的免疫防御中起重要作用。TLR4是人類發(fā)現(xiàn)的第一個TLR相關(guān)蛋白,是目前發(fā)現(xiàn)與腫瘤發(fā)病關(guān)系較密切的TLR家族成員。TLR4的主要配體是革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁成分內(nèi)毒素／LPS。除此之外,TLR4

4、還有很多內(nèi)源性配體,如呼吸道合胞病毒蛋白F、分枝桿菌成分、熱休克蛋白、飽和與不飽和脂肪酸、透明質(zhì)酸片段、表面活性蛋白A等。TLR4活化的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路屬于經(jīng)典的依賴MyD88的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,可啟動NF-κB途徑和應(yīng)激激酶途徑,啟動炎癥因子如YNF-α、IL-1、IL-6和IL-8等的基因轉(zhuǎn)錄,最終釋放大量的細(xì)胞因子及炎癥趨化因子。有研究報道TLR4和NF-κBp65在胃癌、大腸癌、胰腺癌、肝癌等消化道腫瘤組織中都有陽性表達(dá),但其在食管癌組

5、織中是否也有表達(dá)及其意義目前尚無相關(guān)研究及報道。
　　 目的:
　　 本實驗旨在從蛋白水平研究TLR4及其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中的關(guān)鍵因子NF-κBp65在食管癌組織中的表達(dá)情況,分析TLR4、NF-κBp65與腫瘤細(xì)胞分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床病理資料的相關(guān)性,探討TLR4-NF-κB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與食管癌的發(fā)生、發(fā)展是否存在聯(lián)系及其臨床意義。
　　 方法:
　　 本研究用免疫組化法(2步法)檢測30例食管鱗癌組

6、織及20例食管正常組織的TLR4及NF-κB p65的表達(dá),并結(jié)合腫瘤的病理生理學(xué)行為進(jìn)行分析。標(biāo)本均經(jīng)病理證實為食管鱗癌或食管正常組織。實驗結(jié)果采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行X2驗及Spearman等級相關(guān)分析。所有資料間差別均以P值來表示,檢驗水平α=0.05,P<0.05表示有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 1、TLR4蛋白在食管癌組織和正常食管黏膜組織中的陽性表達(dá)率分別為43.3％(13／30)、10％(2／

7、20)；NF-κB p65蛋白在食管癌組織和正常食管黏膜組織中的陽性表達(dá)率分別為56.7％(17／30)、25％(5／20)。
　　 2、在食管癌組織中,TLR4和NF-κBp65的陽性表達(dá)率均明顯高于正常食管黏膜組織中的陽性表達(dá)率,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　 3、TLR4及NF-κBp65的陽性表達(dá)率均與食管癌患者的年齡、性別及腫瘤在食管的部位無關(guān)(P>0.05)。
　　 4、TLR4及NF-κB

8、p65的陽性表達(dá)與腫瘤的分化程度呈負(fù)相關(guān),分化低者表達(dá)越高,TLR4及NF-κB p65與腫瘤分化程度的相關(guān)系數(shù)分別為r=-0.522(P=0.003)和r=-0.522(P=0.005)。
　　 5、NF-κBp65的陽性表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),有轉(zhuǎn)移者NF-κBp65蛋白的表達(dá)率高于無轉(zhuǎn)移者(X2=5.436,P<0.05)。
　　 6、TLR4與NF-κBp65在食管癌組織中的表達(dá)存在正相關(guān)關(guān)系(r=0.426,P=

9、0.019)。
　　 結(jié)論:
　　 1、TLR4與NF-κBp65在食管癌中呈高水平表達(dá),且兩者的表達(dá)均與食管癌的分化程度呈負(fù)相關(guān),說明兩者與食管癌發(fā)生發(fā)展及惡性程度有一定關(guān)系。另外,NF-κB p65的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),說明其在腫瘤細(xì)胞的遷徙、轉(zhuǎn)移中有一定的作用。
　　 2、TLR4與NF-κBp65兩種蛋白的表達(dá)強(qiáng)度之間呈正相關(guān),提示二者可能在促進(jìn)食管癌的發(fā)生發(fā)展中存在一定依存性,對其分子通路的進(jìn)一步研究