益生菌對(duì)卵清蛋白致敏大鼠血清TGF-β水平及Th1-Th2平衡的影響.pdf

1、目的：本研究以卵清蛋白(OVA)致敏大鼠作為FA動(dòng)物模型，采用目前臨床上常用的雙歧桿菌或酪酸桿菌制劑分別在生后哺乳期和嬰幼兒期給予三周療程的干預(yù)，觀察其對(duì)經(jīng)卵清蛋白致敏大鼠血清Th1(IFN—γ、IL-12)及Th2(IL—4)細(xì)胞因子和OVA特異性IgE表達(dá)水平，以及調(diào)節(jié)性T細(xì)胞代表因子TGF—β水平的變化，從形態(tài)和功能相結(jié)合的角度，探討不同時(shí)期給予益生菌對(duì)OVA致敏大鼠的抗過敏作用及相關(guān)機(jī)制，為臨床應(yīng)用益生菌防治FA提供實(shí)驗(yàn)資料和理

2、論依據(jù)。 方法：取新生雌性SD大鼠和3雌性周SD大鼠各32只，分別隨機(jī)分為新生正常對(duì)照組、新生雙歧桿菌組、新生酪酸梭菌組、新生陽(yáng)性對(duì)照組和3周正常對(duì)照組、3周雙歧桿菌組、3周酪酸梭菌組及3周陽(yáng)性對(duì)照組，每組8只；雙歧桿菌或酪酸桿菌組分別予雙歧桿菌或酪酸梭菌散劑加入無(wú)菌稀釋液中灌胃3周，正常對(duì)照組及陽(yáng)性對(duì)照組予無(wú)菌稀釋液灌胃3周；3周后予卵清蛋白腹腔注射及灌胃激發(fā)建立食物過敏動(dòng)物模型，正常對(duì)照組予無(wú)菌生理鹽水進(jìn)行假致敏；最后一次激

3、發(fā)1小時(shí)后麻醉大鼠，摘眼球取血，靜置10～20分鐘后離心留取血清，用雙抗體夾心ELISE法檢測(cè)其中細(xì)胞因子(IL-4、IL-12、IFN-γ及TGF-β)及OVA特異性IgE水平；在大鼠麻醉之后死亡之前，剪開大鼠腹部皮膚，距回盲瓣5cm處取1cm小腸組織2份，分別進(jìn)行固定、切片、染色后行透射電鏡及HE染色觀察。 結(jié)果：⑴新生雙歧桿菌組和新生酪酸桿菌組血清中IL-12濃度均高于新生正常對(duì)照組(P<0.05)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；但

4、和新生陽(yáng)性對(duì)照組相比(P>0.05)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；新生雙歧桿菌組和新生酪酸桿菌組血清中IL-4濃度和新生正常對(duì)照組及新生陽(yáng)性對(duì)照組相比(P>0.05)，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；⑵新生雙歧桿菌組和新生酪酸桿菌組血清中TGF-β、IFN-γ濃度及IFN-γ/IL-4比值均高于新生正常對(duì)照組及新生陽(yáng)性對(duì)照組(P<0.05)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；⑶新生雙歧桿菌組和新生酪酸桿菌組血清中OVA特異性IgE濃度均高于新生正常對(duì)照組(P<0.05)，

5、但均低于新生陽(yáng)性對(duì)照組(P<0.05)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；⑷無(wú)論新生組還是3周組，在OVA特異性IgE、IFN-γ、IL-12、IL-4、TGF-β濃度及IFN-γ/IL-4比值等指標(biāo)上，雙歧桿菌組和酪酸桿菌組相比(P>0.05)，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；⑸3周雙歧桿菌組和3周酪酸桿菌組血清中TGF-β濃度及IFN-γ/IL-4比值高于3周正常對(duì)照組及3周陽(yáng)性對(duì)照組(P<0.05)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；而血清IFN-γ、IL-12、IL-

6、4及OVA特異性IgE濃度等指標(biāo)與3周陽(yáng)性對(duì)照組相比(P>0.05)，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；⑹益生菌組大鼠小腸黏膜病理?yè)p傷較陽(yáng)性對(duì)照組輕，較正常對(duì)照組重。透射電鏡下益生菌組小腸微絨毛基本完整，細(xì)胞器無(wú)明顯腫脹、擴(kuò)張現(xiàn)象，接近正常對(duì)照組，較陽(yáng)性對(duì)照組損傷減輕。 結(jié)論：①雙歧桿菌或酪酸桿菌可以升高OVA致敏大鼠血清中TGF—β、IFN—γ濃度及IFN—γ/IL—4比值，促進(jìn)大鼠Th1細(xì)胞成熟及Th1/Th2平衡；降低血清中OVA特異性

7、IgE濃度；減輕OVA致敏大鼠的腸道黏膜組織損傷。②雙歧桿菌或酪酸桿菌調(diào)節(jié)Th1/Th2平衡并不是通過下調(diào)IL—4水平或者上調(diào)IL-12水平達(dá)到的；而是通過刺激Tr分泌TGF—β增加，促進(jìn)Th1細(xì)胞因子(IFN—γ)的表達(dá)及升高IFN—γ/IL—4比值而發(fā)揮其抗過敏作用。③雙歧桿菌或酪酸桿菌在升高TGF—β、IFN—γ濃度、升高IFN—γ/IL—4比值及降低OVA特異性IgE濃度，減輕腸黏膜組織損傷等方面效果相似。④在防治食物過敏方面，