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1、[ZH9(R)]]是中國(guó)科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所通過(guò)基因槍法將外源溶菌酶基因轉(zhuǎn)化到粳稻中花9號(hào)而獲得的稻瘟病抗性新品系。2001~2004年,該課題組以[ZH9(R)]為溶菌酶基因供體,以秈型雜交稻“兩優(yōu)培九”的父本“9311”、“培兩優(yōu)288”的父本“288”以及“培兩優(yōu)E32”的父本“E32”為受體,通過(guò)回交轉(zhuǎn)育的方法將溶菌酶基因轉(zhuǎn)育到各秈稻親本中并且獲得含有外源溶菌酶基因的株系若干。本試驗(yàn)在此基礎(chǔ)上,對(duì)已獲得的轉(zhuǎn)基因株系進(jìn)行篩
2、選和稻瘟病抗性鑒定以及轉(zhuǎn)育后代雜交組合的優(yōu)選評(píng)價(jià),獲得了稻瘟病抗性提高且產(chǎn)量性狀與對(duì)照無(wú)顯著差別的組合及其父本材料,最終為下一步開(kāi)展組合品比試驗(yàn)奠定基礎(chǔ)。 (一)轉(zhuǎn)溶菌酶基因水稻轉(zhuǎn)育后代純合株系篩選 通過(guò)種子發(fā)芽、抗生素離體葉片篩選和PCR.分子檢測(cè)的方法,對(duì)9311/ZH9(R)、288/ZH9(R)和.E32/ZH9(R)轉(zhuǎn)育后代的7個(gè)不同世代共83個(gè)株系進(jìn)行溶菌酶基因純合株系的篩選,結(jié)果表明:轉(zhuǎn)育后代中溶菌酶基因純
3、合株系39個(gè),株系純合率46.99%。 (二)轉(zhuǎn)溶菌酶基因水稻轉(zhuǎn)育后代稻瘟病抗性鑒定 通過(guò)2005年和2006年連續(xù)兩年對(duì)轉(zhuǎn)育后代的病情調(diào)查,結(jié)論如下: (1)各轉(zhuǎn)育世代的抗病指數(shù)與親本相比有不同幅度降低,降低幅度最大的是288/ZH9(R)BClF5葉瘟病情指數(shù),降幅為70.99%。降幅最小的是E32/ZH9(R)BC3F2穗頸瘟病情指數(shù),降幅為7.79%。說(shuō)明外源溶菌酶基因能夠在轉(zhuǎn)育后代中穩(wěn)定遺傳且保持了廣譜
4、的抗性,只是在不同的遺傳背景下,溶菌酶基因表達(dá)略有差異。 (2) 葉瘟和穗頸瘟的抗性有一定的相關(guān)性,葉瘟病情指數(shù)相對(duì)較高的世代,穗頸瘟的病情指數(shù)也同樣較高。葉瘟病情指數(shù)相對(duì)較低的世代,穗頸瘟的病情指數(shù)也同樣較低。如9311/ZH9(R)葉瘟病情指數(shù)相對(duì)最高的。BC<,4>F<,2>(66.21),其穗頸瘟病情指數(shù)依然相對(duì)最高,為50.94。而葉瘟病情指數(shù)相對(duì)最低的BC3F6(24.80),其穗頸瘟病情指數(shù)依然相對(duì)最低,為25.3
5、9。 (3)從各世代的抗性來(lái)看,基本保持了同一趨勢(shì):在同一轉(zhuǎn)育品種中,自交代和回交代均不相同的情況下,一般自交代高回交代低的世代要比自交代低回交代高的世代的抗性好。如9311/ZH9(R)抗病效果BC3F6>BC5F3、288/ZH9(R)抗病效果BClF5>BC3F2、E32/ZH9(R)抗病效果BClF5>BC3F2。 (4) 同一回交代的不同自交代,抗性呈隨著自交代增加而逐步提高的趨勢(shì)。就桃江病圃穗頸瘟抗病效果來(lái)看
6、,9311/ZH9(R)BC<,4>F<,2>、BC<,4>F<,3>、BC<,4>F<,4>和BC<,4>F<,5>代次是15.77%、26.05%、49.52%和60.79%;288/ZH9(R)BC<,2>F<,4>、BC<,2>F<,6>的抗病效果分別為48.10%和58.50%;E32/ZH9(R)BC<,2>F<,4>、BC<,2>F<,6>的抗病效果21.97%和47.85%。 (5) 共獲得20個(gè)轉(zhuǎn)育世代,其中瀏
7、陽(yáng)和桃江兩病圃抗性評(píng)價(jià)一致為“感(S)”的世代7個(gè)、“中感(MS)”的世代9個(gè),“中抗(MR)”世代3個(gè),E32/ZH9(R)BC2F6的抗性評(píng)價(jià)上,桃江病圃和瀏陽(yáng)病圃的結(jié)論不一致,前者為“感(S)",而后者為“中感(MS)”。 (三)轉(zhuǎn)溶菌酶基因水稻轉(zhuǎn)育后代雜交組合優(yōu)選評(píng)價(jià) 通過(guò)穗頸瘟抗性鑒定和產(chǎn)量性狀分析, 35個(gè)待選組合中,共篩選出13個(gè)抗性提高且單株產(chǎn)量與對(duì)照相比無(wú)顯著性差別的轉(zhuǎn)育后代雜交組合,這13個(gè)組合的父本
8、來(lái)自9個(gè)單株和4個(gè)株系。這9個(gè)單株是9311/ZH9(R)BC<,5>F<,1>代的XLI-1-1-1、BC<,4>F<,3>的XA-2-2-1、XA-3-1-1、XA-4-1-5、XA-5-2-3、XA-6-2-9;288/ZH9(R)BC4F]代的XL-Ⅱ-7-1-6;E32/ZH9(R)BC4Fl代的XLⅢ-4-1-2、BC<,3>F<,2>代的PA64S/Xj-2-1-2。4個(gè)株系分別是9311/ZH9(R)BC<,4>F<,3
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