水稻稻瘟病抗性基因Pi36抗性機理的初步研究.pdf

1、稻瘟病是水稻生產(chǎn)上最具毀滅性的病害之一，分布廣、危害大，長期困擾水稻的生產(chǎn)。相對于化學(xué)防治法的高成本和高污染，培育和合理利用抗病品種，是對這一病害最經(jīng)濟和最安全的控制手段，發(fā)掘具有廣譜抗性的新抗源，是抗稻瘟病育種的主要研究方向。稻瘟病抗性基因Pi36是利用圖位克隆法克隆的一個新基因，抗性穩(wěn)定，為育種學(xué)家提供了新的抗源。本研究在前人工作基礎(chǔ)上，進一步探討了Pi36的抗性機制。主要結(jié)果如下：
　　 1.構(gòu)建了Pi36的超量表達載體，

2、進行針對感病品種麗江新團黑谷(Lijiangxintuanheigu，LTH)的遺傳轉(zhuǎn)化，并得到了一定數(shù)量的轉(zhuǎn)基因植株。利用人工輔助接種鑒定T1代轉(zhuǎn)基因植株，發(fā)現(xiàn)其抗病性明顯提高。對葉片進行臺盼藍染色發(fā)現(xiàn)葉片在稻瘟病菌侵染后發(fā)生了細胞死亡，阻止了病菌的進一步侵入，從而使轉(zhuǎn)基因植株抗性提高。同時利用實時定量PCR對轉(zhuǎn)基因水稻中Pi36相關(guān)防衛(wèi)基因表達量進行分析，初步推測Pi36介導(dǎo)抗性與水楊酸信號途徑有關(guān)。
　　 2.MAPK基因

3、在植物防衛(wèi)反應(yīng)信號傳導(dǎo)方面具有重要作用，本研究通過實時定量PCR，比較了17個OsMAPK基因在Pi36介導(dǎo)的抗性反應(yīng)中的表達差異性，結(jié)果表明OsMAPK2、OsMAPK4、OsMAPK8和OsMAPK15 4個基因在抗病品種中誘導(dǎo)表達上調(diào)，而在感病品種中沒有誘導(dǎo)表達。說明這4個基因可能參與稻瘟病抗性基因Pi36介導(dǎo)的抗性反應(yīng)信號傳導(dǎo)。
　　 3.為了探究MAPK基因在Pi36介導(dǎo)的抗性反應(yīng)信號途徑中的功能，選擇差異表達的OsM