LC-MS聯(lián)用技術(shù)分析金線蓮中黃酮類和銀線蓮中核苷類活性成分及銀線蓮指紋圖譜的研究.pdf

1、LC-MS聯(lián)用技術(shù)是中藥化學(xué)成分定量、定性分析的重要手段之一。本論文應(yīng)用LC-MS聯(lián)用技術(shù)分析金線蓮的4種黃酮類成分；銀線蓮的6種核苷類成分；并以銀線蓮化學(xué)成分研究為基礎(chǔ)，建立了銀線蓮高效液相（HPLC）的指紋圖譜，為此藥材整體質(zhì)量控制提供依據(jù)，并利用所建立的指紋圖譜，區(qū)分同一個(gè)科別不同種屬的金線蓮和銀線蓮藥材。本研究分為三個(gè)部分：
　　第一章：LC-MS分析金線蓮中4種黃酮類物質(zhì)。應(yīng)用超聲波輔助恒溫萃取法提取金線蓮中的異鼠李素-

2、3-O-新橙皮糖苷、異槲皮苷、槲皮素和異鼠李素4種黃酮類化合物，高效液相色譜法－電噴霧電離/離子阱質(zhì)譜法（HPLC－ESI/MS)對(duì)提取物中4種黃酮類化合物進(jìn)行測(cè)定和鑒別。色譜條件：Agilent TC-C18柱(4.6 mm×250 mm，5μm)，流動(dòng)相：A-0.8％乙酸+0.2%氨水溶液，B-甲醇，梯度洗脫:0-10 min，50-58%B；10.01-30 min，65%B。流速：1.0 ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)：368 nm，柱

3、溫：30℃，進(jìn)樣量：20μl。質(zhì)譜條件：電噴霧離子源(ESI源)，正離子監(jiān)測(cè)。不同產(chǎn)地金線蓮中異鼠李素-3-O-新橙皮糖苷、異槲皮苷、槲皮素和異鼠李素含量分別是：福建產(chǎn)地0.0940 mg/g、0.0530 mg/g、0.0390 mg/g和0.0700 mg/g，廣西產(chǎn)地0.0890 mg/g、0.0670 mg/g、0.0420 mg/g和0.0610 mg/g；此法分析金線蓮中這4種黃酮類物質(zhì)具有快速、簡(jiǎn)便的特點(diǎn)，且不同產(chǎn)地金線蓮

4、中這4種具有重要藥理活性黃酮類化合物含量有差異，首次發(fā)現(xiàn)金線蓮中含有異鼠李素-3-O-新橙皮糖苷。
　　第二章LC－MS分析銀線蓮中6種核苷類物質(zhì)。應(yīng)用超聲波輔助萃取法水提銀線蓮中的胞苷、尿苷、腺嘌呤、肌苷、鳥苷、腺苷6種核苷類物質(zhì)，高效液相色譜法－電噴霧電離/離子阱質(zhì)譜法（HPLC－ESI/MS)對(duì)提取物中6種核苷類物質(zhì)進(jìn)行測(cè)定和鑒別。色譜條件：Agilent TC-C18(4.6 mm×250 mm，5μm)色譜柱，流動(dòng)相：A

5、-0.1 mol/L乙酸銨水溶液；B-甲醇，線性梯度洗脫；流速：1.0 ml/min，柱溫：30℃，檢測(cè)波長(zhǎng)：260 nm，進(jìn)樣量：20μl。質(zhì)譜條件：電噴霧離子源(ESI源)，正離子監(jiān)測(cè)。銀線蓮藥材中檢測(cè)到胞苷、尿苷、腺嘌呤、肌苷、鳥苷和腺苷6種核苷成分，6種核苷成分濃度在1.25～80.0μg/ml范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系（r≥0.9994)，回收率在92.7%～96.8%之間，RSD≤1.6%。測(cè)得銀線蓮藥材提取物中胞苷、尿苷、腺嘌呤

6、、肌苷、鳥苷和腺苷含量分別為0.106 mg/g、0.339 mg/g、0.0699 mg/g、0.0820 mg/g、0.0308 mg/g和0.107 mg/g。此法簡(jiǎn)便、靈敏快速，首次報(bào)道銀線蓮中含有重要藥理活性的6種核苷類物質(zhì)，為銀線蓮的藥理和臨床試驗(yàn)研究提供理論基礎(chǔ)。
　　第三章銀線蓮高效液相指紋圖譜研究。通過銀線蓮化學(xué)成分的研究，建立了銀線蓮高效液相（HPLC）指紋圖譜，為規(guī)范銀線蓮藥材的質(zhì)量研究提供基礎(chǔ)研究資料；對(duì)提