肌無力Ⅱ號膠囊急性毒性研究及其對脾虛證小鼠學(xué)習(xí)記憶的影響.pdf

1、目的：
　　1.觀察肌無力Ⅱ號膠囊灌胃14日后小鼠產(chǎn)生的急性毒性反應(yīng)和死亡情況，以評價其安全性；
　　2.建立脾虛證小鼠模型，觀察海馬神經(jīng)元的變化，并從行為學(xué)、病理形態(tài)學(xué)及分子免疫學(xué)角度研究中藥對脾虛證小鼠學(xué)習(xí)記憶的影響，探討其機理。
　　方法：
　　1.將肌無力Ⅱ號膠囊的內(nèi)容物以最大濃度給 KM小鼠灌胃，發(fā)現(xiàn)小鼠沒有出現(xiàn)死亡，未測出LD50，故測其最大給藥量；
　　2.采用利血平皮下注射建立脾虛小鼠模型，

2、造模第1~9天0.15 mg/(kg·d)，第10~12天0.25 mg/(kg·d)，第13天0.5 mg/(kg·d)，正常對照組同法注射同量注射用水。采用尼氏染色法觀測小鼠海馬神經(jīng)元損傷情況，中藥治療后觀察小鼠的行為學(xué)改變，采用免疫組化法檢測小鼠海馬及大腦皮層nNOS蛋白表達的變化，采用原位雜交法觀察小鼠海馬及大腦皮層NMDAR1 mRNA表達的變化。
　　結(jié)果：
　　1、肌無力Ⅱ號膠囊最大給藥量為30g/kg。

3、>　　2、與正常組比較，脾虛小鼠其學(xué)習(xí)能力及記憶能力均下降（P<0.01）；海馬區(qū)神經(jīng)元排列稀疏、尼氏小體減少；海馬CA1區(qū)nNOS表達減少（P<0.01），大腦皮層nNOS蛋白表達增加（P<0.01）；海馬CA3區(qū)NMDAR1 mRNA表達減少（P<0.01），大腦皮層改變不明顯（P﹥0.05）。
　　3、與模型組比較，中藥能改善脾虛小鼠的學(xué)習(xí)能力（P<0.01），但對記憶能力影響不大（P﹥0.05）；海馬CA1區(qū)nNOS表達增