胃疼寧膠囊急性毒性、長期毒性安全性評價研究.pdf

1、目的：通過開展胃疼寧膠囊急性毒性實驗研究及長期毒性實驗研究，對胃疼寧膠囊的臨床前安全性作出評價。
　　方法：急性毒性實驗研究中，選用清潔級 KM小鼠，以胃疼寧膠囊的最大配制濃度0.67g/ml及按0.4ml/10g的最大給藥量單次灌胃給藥，與溶媒對照組(0.1％CMC-Na溶液)和空白組(0.9%的生理鹽水)作比較，持續(xù)密切觀察14天，記錄小鼠的一般行為、體重、飲食飲水量、活動度、毒性反應(yīng)及其死亡率。長期毒性實驗研究中，將 SD大

2、鼠用 Excel隨機分組法分為6組，每組30只，雌雄各半，分別為空白對照組(0.9%的生理鹽水)、溶媒對照組(0.1%CMC-Na溶液)、陽性對照組(以0.1%CMC-Na溶液為助溶劑配制成的胃疼寧片溶液)、胃疼寧膠囊低劑量組(2.31g/kg.bw)、中劑量組(4.62g/kg.bw)和高劑量組(6.93g/kg.bw)。每天定時灌胃給藥1次，每周給藥6天，連續(xù)灌胃給藥90天。每周稱其體重1次，并根據(jù)體重調(diào)整給藥量，每天進行籠旁觀察，

3、記錄大鼠的一般行為狀態(tài)。于給藥期第90天和停藥后恢復(fù)期14天結(jié)束時分別處死2/3(20只)、1/3(10只)(每組雌雄各半)的動物，采用腹主動脈采血進行血液學(xué)、血液生化學(xué)、凝血功能等指標(biāo)檢測，肉眼觀察動物臟器組織，并稱其濕重，以及做常規(guī)病理組織學(xué)檢查。
　　結(jié)果：急性毒性最大給藥量實驗研究表明，小鼠給予胃疼寧膠囊的最大給藥量是26.8g/kg，小鼠沒有出現(xiàn)死亡和一般行為的異常，與空白對照組、溶媒對照組相比體重沒有顯著性差異(P＞0

4、.05)。
　　長期毒性實驗研究結(jié)果表明，整個實驗周期中大鼠沒有出現(xiàn)一般行為的異常和死亡情況，各劑量組與各對照組大鼠的體重相比無顯著性差異(P＞0.05)。說明胃疼寧膠囊對動物的正常機能代謝無明顯影響。
　　血液學(xué)中，實驗給藥期有幾類紅細胞類指標(biāo)和白細胞類指標(biāo)與溶媒對照組相比較有顯著性差異，分別為高劑量組血紅蛋白(HGB)雌性偏低(P＜0.05)、雄性偏高(P＜0.01)，血小板平均體積(MPV)雌性偏高(P＜0.05)，網(wǎng)

5、織紅細胞(Ret)雌性偏低(P＜0.05)，紅細胞壓積(PCT)雄性偏低(P＜0.01)，單核細胞數(shù)(MONO＃)雄性偏低(P＜0.01)，中性粒細胞數(shù)比率(NEUT%)雄性偏低(P＜0.01)，PT百分活動度(PT%)雌性偏高(P＜0.01)；中劑量組血小板平均體積分布寬度(PDW)雌性偏高(P＜0.01)，大型血小板比率(P-LCR)雌性偏高(P＜0.01)，平均血紅蛋白含量(MCV)雄性偏高(P＜0.01)；停藥后恢復(fù)期雄性高劑量

6、組嗜酸性細胞比率(EO%)，紅細胞(RBC)，紅細胞平均體積(MCV)，凝血酶原時間(PT)與溶媒對照組比較有顯著性差異(P＞0.05)，但是其數(shù)值的波動均在動物正常生理參考值范圍之內(nèi)，這可能是動物的一過性引起，故說明胃疼寧膠囊對大鼠血液學(xué)指標(biāo)無明顯不良影響。
　　血液生化學(xué)中，實驗給藥期有幾類肝功能和腎功能指標(biāo)與溶媒對照組比較有顯著性差異，分別為高劑量組谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)雌性偏低(P＜0.01)、雄性偏低(P＜0.01)，堿性

7、磷酸激酶(ALP)雌性偏低(P＜0.01)，總膽紅素(TBIL)雌性偏高(P＜0.01)，甘油三酯(TG)雌性偏低(P＜0.01)；中劑量組總蛋白(TP)雌性偏低(P＜0.01)，白蛋白(ALB)雌性偏高(P＜0.01)，葡萄糖(GLU)雄性偏高(P＜0.05)；低劑量組尿素(UREA)雌性偏高(P＜0.01)，氯離子濃度(Cl-)雌性偏低(P＜0.01)；停藥后恢復(fù)期雌性高劑量組白蛋白(ALB)雌性偏高(P＜0.05)與溶媒對照組有顯

8、著性差異，但與空白對照組比較無顯著性差異；中劑量組葡萄糖(GLU)雌性偏高(P＜0.05)與溶媒對照組比較有顯著性差異，但高劑量組葡萄糖偏低，兩者之間無量效關(guān)系且均在正常參考值范圍內(nèi)波動，上述指標(biāo)雖有統(tǒng)計學(xué)意義但無生物學(xué)意義，故說明胃疼寧膠囊對大鼠血液生化學(xué)指標(biāo)無明顯不良影響。
　　臟器系統(tǒng)中，除了實驗給藥期雌性高劑量組肝臟系數(shù)偏高(P＜0.05)、脾臟系數(shù)偏低(P＜0.05)，其余各劑量組雌、雄大鼠的各項臟器濕重系數(shù)與溶媒對照組

9、均無顯著性差異(P＞0.05)。在停藥后恢復(fù)期也未出現(xiàn)肝臟偏高及脾臟系數(shù)偏低的現(xiàn)象，且對其做常規(guī)病理組織學(xué)檢查，光鏡下觀察無病理改變；恢復(fù)期雌性溶媒組卵巢偏大，個別雌性大鼠處于排卵期，病理組織學(xué)觀察明顯可見各級卵泡；雌性高劑量組肺臟系數(shù)略小，但在正常參考值范圍內(nèi)波動，雖有統(tǒng)計學(xué)意義而無生理學(xué)意義，所以該藥物無延遲性毒性反應(yīng)，故說明胃疼寧膠囊對大鼠臟器系數(shù)無明顯影響。
　　病理組織學(xué)中，對實驗動物大體解剖，肉眼觀察實驗給藥期及恢復(fù)期

10、各對照組和各給藥組未見明顯病理改變。光鏡下觀察發(fā)現(xiàn)實驗給藥期有脾充血10例，肺充血9例，由于各對照組和給藥組都存在這一現(xiàn)象，且只見血管擴張，未見含鐵血黃素沉積，說明只是一時性，可能與處死動物方法及取材有關(guān)，與藥物作用沒有明顯關(guān)系。實驗給藥期各劑量組及各對照組各有1例間質(zhì)性肺炎、空白對照組1例可見氣管周圍較多淋巴細胞浸潤，考慮其原因可能和飼養(yǎng)環(huán)境或長期灌胃刺激有關(guān)，而引起的動物疾病。高劑量組有1例食管壁有含鐵血黃素沉積，說明有陳舊性出血，

11、可能是長期灌胃操作不當(dāng)所致。實驗給藥期有5例腸黏膜慢性炎，由于各對照組和各劑量組光鏡下觀察均可見動物腸管壁有不同程度的非特異性炎癥及腸道黏膜上皮細胞脫落等現(xiàn)象，這可能是長期灌胃操作刺激或取材時操作不當(dāng)引起的黏膜脫落，故可認為胃疼寧膠囊對大鼠腸道無損害性改變。低劑量組有1例雌性動物卵巢有濾泡囊腫，屬于大鼠的一種自發(fā)性疾病。除上述臟器組織光鏡下察有明顯改變外，其余各劑量組和各對照組動物臟器組織學(xué)檢查未見明顯病理改變。
　　結(jié)論：急性毒