DPPIV和Seprase在上皮性卵巢癌中的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、卵巢癌是婦女最常見的生殖器芯性腫瘤之一，其死亡率居婦科惡性腫瘤之首。惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移是一個多步驟的過程，細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜重塑是癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移過程中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，需借助于蛋白降解酶的表達(dá)和激活。細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜的主要成分是膠原，膠原成分的破壞有利于腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移。明膠酶能降解基底膜膠原、纖連蛋白和彈性蛋白，明膠酶在多種惡性腫瘤組織、培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞及癌基因轉(zhuǎn)化細(xì)胞中活性增強，體內(nèi)、外侵襲實驗也證實腫瘤細(xì)胞的高侵襲能力與明膠酶的活性增強有關(guān)

2、。目前所知與腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移有關(guān)的細(xì)胞外基質(zhì)降解蛋白酶有四種：絲氨酸蛋白酶(serine-integralmembranepeptidase，SIMP)、基質(zhì)金屬蛋白酶(matrixmetalloproteinase，MMPs)、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶。絲氨酸蛋白酶是一組重要的細(xì)胞外基質(zhì)降解酶，二肽基肽酶Ⅳ(DipeptidylpeptidaseIV,DPPIV)、Seprase(Surfaceexpressedorotease，

3、Seprase)是SIMP家族的典型代表，結(jié)構(gòu)上具有高度同源性，二者均具有二肽酶活性(DP)和明膠酶活性，對細(xì)胞外基質(zhì)中多種成份具有降解作用，在腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮作用。 目前，關(guān)于DPPIV和Seprase與腫瘤關(guān)系的研究大部分基于體外研究和動物實驗或較少數(shù)量的臨床樣本，二者是促進(jìn)腫瘤的形成與浸潤轉(zhuǎn)移還是抑制腫瘤生長，不同實驗室結(jié)果仍有爭議。迄今為止，有關(guān)DPPIV和Seprase在卵巢癌組織和胸腹水脫落細(xì)胞中表達(dá)情況還不清楚

4、。因此，為探討卵巢癌患者DPPIV和Seprase的表達(dá)及其與臨床病理因素和生存的關(guān)系，尋求能反映卵巢癌生物學(xué)行為的分子學(xué)指標(biāo)，本文采用免疫組織化學(xué)、原位雜交、顯微切割技術(shù)(microdissection)輔助的RT-PCR及Westernblot分析等技術(shù)聯(lián)合檢測了378例挪威人上皮性卵巢癌組織和75份胸腹水石蠟切片、3l例新鮮冰凍卵巢癌組織和34例新鮮腹水中DPPIV和Seprase蛋白質(zhì)和mRNA的表達(dá)；并初步探討了DPPIV和S

5、eprase蛋白表達(dá)與臨床病理因素和預(yù)后的關(guān)系；同時采用免疫組織化學(xué)、RT-PCR和Westernblot分析等技術(shù)檢測了卵巢癌細(xì)胞系SKOV3、OVCAR3中DPPIV和Seprase蛋白質(zhì)和mRNA的表達(dá)。通過以上實驗，旨在闡明DPPIV和Seprase在上皮性卵巢癌中的表達(dá)方式及預(yù)后價值，并為卵巢癌的基因治療提供理論依據(jù)。 本實驗分為以下兩部分： 第一部分DPPIV和Seprase在上皮性卵巢癌組織中的表達(dá)及其臨床