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文檔簡介
1、目的:
制備合成水溶性ZnS:Mn量子點,研究其熒光成像,磁共振增強性及放射增敏性,初步探討ZnS:Mn量子點的放射增敏機制。
方法:
應用水相共沉淀法制備水溶性ZnS:Mn量子點,并采用DLS,XRD對其理化性質進行表征;運用熒光分光光度計,熒光倒置顯微鏡研究量子點細胞內熒光成像情況;并使用核磁共振成像儀、磁共振系統(tǒng)分析磁共振增強效果;在研究放射增敏性實驗中,采用MTT實驗檢測量子點對Hela、U373細
2、胞系的增殖抑制作用,克隆形成實驗檢測量子點聯(lián)合電離輻射對U373細胞系的殺傷作用,并繪制細胞存活曲線;在增敏機制的探討中,以U373細胞系為研究對象,通過ROS試劑盒檢測細胞內活性氧含量,流式細胞儀分析細胞周期分布,Western Blot法測定細胞Bcl-2,Caspase-3蛋白表達。
結果:
1.制備的ZnS:Mn量子點水溶性好、粒徑均一(約5nm),結構穩(wěn)定。
2. ZnS:Mn量子點在紫外燈照射下
3、發(fā)出橙色熒光,發(fā)射光譜可見590nm處熒光峰,并可進入細胞內進行熒光成像。
3.核磁共振分析儀,全身磁共振成像系統(tǒng)分析結果顯示:ZnS:Mn量子點可顯著縮短T1弛豫時間,其r1=8.05,r2=21.93,磁共振掃描可見T1圖像增強;
4.MTT實驗結果顯示:ZnS:Mn量子點可對 Hela、U373細胞系產(chǎn)生增殖抑制作用,隨著藥物濃度的升高,細胞增殖活性下降,其差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05);隨著時間延長,細胞活
4、性有下降趨勢,但差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
5.克隆形成實驗結果及細胞存活曲線參數(shù)顯示:量子點照射組(Q+R組)與單純照射組(R組)相比,放射敏感性指標D0,SF2,N,Dq均呈現(xiàn)不同程度的下調,其 SERD0=1.16,提示ZnS:Mn量子點對U373細胞系具有放射增敏效應。
6.ROS試劑盒檢測結果顯示:ZnS:Mn量子點聯(lián)合照射后U373細胞內ROS表達水平較單純照射組提高,Q+R組、R組的X-Mean
5、值分別為60.9±1.4,43.0±0.8,其差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05);
7.流式細胞儀檢測結果顯示:ZnS:Mn量子點可增強輻射誘導的細胞 G2/M期阻滯,Q+R組、R組細胞G2/M期比例分別為(41.99±1.23)%、(34.03±1.58)%,其差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
8. Western Blot結果顯示:Q+R組Bcl-2蛋白表達較R組降低;而Caspase-3蛋白表達則相反。
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