Rho-Rho激酶信號(hào)通路在大鼠急性壞死性胰腺炎中的作用及機(jī)制初探.pdf

1、急性壞死性胰腺炎(acute necrosis pancreatitis，ANP)的發(fā)病機(jī)制仍不明確，可能與胰酶的激活、胰腺微循環(huán)障礙、炎性細(xì)胞因子過度激活、氧自由基的作用等有關(guān)。最近研究表明，Rho/Rho激酶信號(hào)通路是體內(nèi)重要的分子開關(guān)，參與多種生物學(xué)行為，如調(diào)節(jié)胰酶的分泌、氧自由基的形成等。Y-27632可抑制Rho激酶，被廣泛用于研究和闡明Rho/Rho激酶信號(hào)通路的體內(nèi)生物學(xué)效應(yīng)。對(duì)于Rho/Rho激酶信號(hào)通路在ANP中的作用

2、的研究國內(nèi)未見報(bào)道。
　　 目的：觀察抑制Rho/Rho激酶信號(hào)通路對(duì)大鼠ANP的影響，并探討其作用機(jī)制。
　　 方法：24只健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠，體重240-280g，隨機(jī)分成3組：ANP組(A組)、Rho/Rho激酶抑制劑Y-27632預(yù)處理組(B組)、生理鹽水對(duì)照組(C組)。A組采用3.5％?；悄懰徕c溶液(1ml/kg)逆行注入胰膽管建立ANP模型。B組于術(shù)前30min腹腔內(nèi)注射Y-27

3、632(5mg/kg)，余處理同A組。C組采用生理鹽水逆行注入胰膽管。各組術(shù)后4h尾靜脈采血，24h處死動(dòng)物。觀察：(1)胰腺大體炎癥改變；(2)血清淀粉酶的動(dòng)態(tài)變化；(3)血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、丙二醛(maleic dialdehyde，MDA)的改變；(4)胰腺組織髓過氧化物酶(myeloperoxidase，MPO)的改變；(5)胰腺組織病理學(xué)改變；(6)免疫組化檢測(cè)Rho相關(guān)蛋白

4、激酶I(Rho-associatedprotein kinase I，ROCK I)的改變。
　　 結(jié)果：(1)胰腺大體改變：A組胰腺呈灰白色，無光澤，充血水腫明顯，可見大片壞死，胰腺表面及胃網(wǎng)膜可見皂化斑，腹腔內(nèi)有血性腹水；B組胰腺呈暗紅色，無光澤，充血水腫明顯，小片狀壞死，胰腺皂化斑少，腹腔內(nèi)腹水顏色清亮；C組胰腺呈粉紅色，光澤度好，無水腫，腹腔內(nèi)無腹水或少量清亮腹水，無皂化斑。
　　 (2)血清淀粉酶變化：在4h、

5、24h觀察點(diǎn)，各組淀粉酶分別為：A組(3747.38±256.90，2933.75±181.78)；B組(1694.25±326.58，1323.25±313.53)；C組(902.25±92.02，646.75±102.81)。在各觀察時(shí)間點(diǎn)A組和B組淀粉酶明顯升高，與C組相比差異具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；A組與B組相比差異具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
　　 (3)A組大鼠血清SOD值明顯下降，MDA值明

6、顯升高，與C組比較差異具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。B組能減少SOD的下降及MDA的升高，與A組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 (4)ANP大鼠胰腺組織。MPO活性明顯升高，Y-27632抑制Rho/Rho激酶信號(hào)通路可減少M(fèi)PO的活性升高。各組大鼠胰腺組織MPO活性兩兩比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)
　　 (5)胰腺組織病理學(xué)損傷評(píng)分：A組大鼠胰腺損傷評(píng)分明顯升高，與C組比較差異具有顯

7、著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。B組大鼠胰腺損傷評(píng)分與A組相比明顯下降，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 (6)ROCK I蛋白在胰腺組織的表達(dá)變化：A組可見ROCK I強(qiáng)陽性表達(dá)棕黃色，B組可見ROCK I陽性表達(dá)淡黃色，C組可見ROCK I弱陽性表達(dá)淺黃色。ROCK I蛋白半定量分析，各組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 結(jié)論：(1)Y-27632可以抑制Rho/Rho激酶信號(hào)通路，減少ROCK1