山藥的快速繁殖與盾葉薯蕷的毛狀根誘導(dǎo).pdf

1、薯蕷屬(Dioscorea)植物是我國重要的植物資源。本文研究對象為江西省瑞昌縣一種特色的薯蕷屬植物-瑞昌山藥(Dioscorea opposita“ruichang”)，該品種山藥食用時(shí)口感好，營養(yǎng)價(jià)值高，還具有重要的藥用價(jià)值，深受市場的歡迎。但目前存在產(chǎn)量低、品種退化、市場需求量大等問題。本研究利用其藤狀莖段為外植體，探索了莖段側(cè)芽萌發(fā)、幼莖增殖、多芽體誘導(dǎo)與增殖和組培苗生根等快速繁殖技術(shù)環(huán)節(jié)中的激素配比問題，系統(tǒng)研究了由外植體建立

2、無菌苗體系的具體過程及影響因素并成功的建立了快速繁殖體系。主要研究成果如下： 初代培養(yǎng)時(shí)，山藥莖段生長最適合的培養(yǎng)基類型為1/2MS培養(yǎng)基，帶頂芽的莖段都能在添加6-BA、NAA或IBA等常規(guī)激素組合的1/2MS培養(yǎng)基上生長；而只帶側(cè)芽的莖段最高有11.5％的有伸長或形成了少量的新的幼莖。在添加適量濃度Ac的各種常規(guī)激素的培養(yǎng)基上，帶頂芽的莖段100％生長，幼莖形成率為每個(gè)莖段新生幼莖4-7節(jié)，不帶頂芽的莖段最高有15.2％有生

3、長，平均新生幼莖4節(jié)。添加TDZ之后含頂芽的莖段仍可 100％生長，而不帶頂芽的莖段開始萌發(fā)側(cè)芽并膨大形成多芽體，當(dāng)添加TDZ2.0mg/L+NAA0.5mg/L 時(shí)側(cè)芽膨大率達(dá)到 17.9％，而添加TDZZ1.0mg/L+NAA1.0mg/L時(shí)側(cè)芽分生節(jié)數(shù)最多達(dá)每莖段新生4.5節(jié)。在液體培養(yǎng)基上莖段側(cè)芽膨大形成愈傷組織而未見分化或生長，帶頂芽的莖段伸長也很少。此外，還研究了幾種防褐化試劑對山藥生長的影響，研究表明能明顯降低山藥生長時(shí)褐

4、化的方法為添加Ac 2g/L，并在接種20d后轉(zhuǎn)移到新的含低濃度的Ac的培養(yǎng)基上。將形成的多芽體的新幼莖于生根培養(yǎng)基中生根，其最佳生根培養(yǎng)基為1/2MS+IBA2.0mg/L+NAA0.5mg/L，生根率達(dá)到73.7％。組培苗移栽60d后，成活率高達(dá)88％，且苗木生長健壯。 本文還研究了盾葉薯蕷 (Dioscorea．zingiberensis Wright) 的毛狀根誘導(dǎo)技術(shù)，探討了誘導(dǎo)過程中各種影響因素，以及毛狀根的培養(yǎng)增殖

5、方法。具體結(jié)果如下： 用發(fā)根農(nóng)桿菌A4和R1601均能誘導(dǎo)盾葉薯蕷的愈傷組織產(chǎn)生毛狀根，而葉片和莖段無法誘導(dǎo)出毛狀根，且在相同外界條件下，R1601誘導(dǎo)效果好于A4菌株，最高誘導(dǎo)率有76.1％。用同樣的方法在葉片、愈傷組織、莖段3種外植體中各添加新鮮煙草細(xì)胞后共同感染，在莖段切口處有少量毛狀根發(fā)生，但誘導(dǎo)率很低只有12.5％；葉片仍然無法誘導(dǎo)出根；愈傷組織的毛狀根誘導(dǎo)率比同樣條件下未添加煙草細(xì)胞的要好，其最高誘導(dǎo)率達(dá)到86.8％

6、。以愈傷組織為外植體，進(jìn)行了了各種影響毛狀根誘導(dǎo)的影響因素的實(shí)驗(yàn)研究。并得出其最佳誘導(dǎo)條件為：采用菌液的OD600=0.6的農(nóng)桿菌R1601去感染添加新鮮煙草葉片了的愈傷組織15Min，其中愈傷組織已經(jīng)過預(yù)培養(yǎng)4-5d，之后轉(zhuǎn)移至附加As 50-100umol/L 的1/2MS培養(yǎng)基上共培養(yǎng)4d，愈傷組織上誘導(dǎo)效果最好。毛狀根的首次除菌采用 1/2+Fim150mg/L，之后不斷降低Tim濃度到新培養(yǎng)基上，大約2個(gè)月后即可除菌徹底。盾葉