熒光增白劑聯(lián)合抗真菌藥物對(duì)紅色毛癬菌的抗菌活性研究.pdf

1、紅色毛癬菌(Trichophyton rubrum)是引發(fā)淺部真菌病的主要致病菌，約占60％。目前開(kāi)發(fā)出了多種不同的抗真菌藥物，但是存在著毒副作用大，以及致病菌的耐藥性問(wèn)題。當(dāng)前大多數(shù)的抗真菌劑都是針對(duì)真菌特異性代謝途徑--麥角甾醇合成途徑開(kāi)發(fā)的。但是針對(duì)抗真菌藥物的另外一條特殊代謝途徑－細(xì)胞壁的合成途徑作為藥物靶標(biāo)的研究還相對(duì)較少。因此，發(fā)現(xiàn)和研究以細(xì)胞壁的合成途徑為藥物靶標(biāo)的藥物及其衍生藥物對(duì)臨床治療皮膚癬菌引起的淺部真菌病以及克服

2、真菌耐藥性有重要的意義。
　　研究目的：
　　主要研究熒光增白劑CBS（flourescent brightener CBS，CBS）對(duì)紅色毛癬菌的抑制效果及作用機(jī)理，通過(guò)均勻設(shè)計(jì)優(yōu)化其與抗真菌藥物的聯(lián)合配方，并用動(dòng)物模型驗(yàn)證優(yōu)化方案的治療效果，為進(jìn)一步深入研究二苯乙烯類熒光增白劑作為抗真菌藥物奠定基礎(chǔ)。
　　研究方法：
　　采用濾紙片擴(kuò)散法檢測(cè)CBS對(duì)紅色毛癬菌和其他致病菌的抑制效果；小培養(yǎng)法結(jié)合顯微觀察的方法

3、研究CBS抑制紅色毛癬菌的作用機(jī)理；采用改良CLSI M38-A2方法分析判斷CBS與抗真菌藥物的協(xié)同作用；用均勻設(shè)計(jì)方法結(jié)合SPSS軟件建立模擬方程，并通過(guò)驗(yàn)證試驗(yàn)確定最優(yōu)配方；用豚鼠構(gòu)建紅色毛癬菌感染的動(dòng)物模型，評(píng)價(jià)優(yōu)化配方的實(shí)際藥用效果。
　　研究結(jié)果：
　　①濾紙片擴(kuò)散法檢驗(yàn)為CBS在5mg/ml和10mg/ml時(shí)對(duì)紅色毛癬菌都有抑制作用，且都是極敏的;CBS對(duì)其他的致病菌也有一定的抑制效果，熒光增白劑CBS對(duì)于石膏

4、樣小孢子菌和大腸埃希氏菌是高敏的，CBS對(duì)于金黃色葡萄球菌是低敏的。
　　②用小培養(yǎng)法觀察CBS的作用機(jī)理，可以初步判斷CBS作用于紅色毛癬菌的菌絲的細(xì)胞壁部位，使菌絲逐漸變細(xì)，且隨著時(shí)間的增加菌絲出現(xiàn)斷裂和消減。
　?、鄄捎酶牧糃LSI M38-A2方法結(jié)合SPSS軟件分析得到，單一使用CBS時(shí)，當(dāng)CBS濃度是2.5mg/ml時(shí)對(duì)紅色毛癬菌的抑制作用最強(qiáng)；當(dāng)酮康唑聯(lián)合CBS使用時(shí)，分析得出酮康唑與CBS之間存在協(xié)同作用，且

5、酮康唑是2ug/ml，CBS是2.5mg/ml時(shí)，對(duì)紅色毛癬菌的抑制作用最強(qiáng)；當(dāng)特比萘芬聯(lián)合CBS使用時(shí)，分析得出特比萘芬與CBS之間存在協(xié)同作用，且特比萘芬是0.0625ug/ml，CBS是5mg/ml時(shí)，對(duì)紅色毛癬菌的抑制作用最強(qiáng)。
　?、芫鶆蛟O(shè)計(jì)結(jié)合驗(yàn)證試驗(yàn)得到最優(yōu)配方，結(jié)果為熒光增白劑CBS濃度為1.861mg/ml,酮康唑濃度為1.5ug/ml，SDS濃度為0.0774mg/ml，特比萘芬濃度為0.175ug/ml，氮酮