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文檔簡介
1、目的:紅色毛癬菌是導(dǎo)致皮膚真菌病的最常見的皮膚癬菌,可引起皮膚和甲板的感染,呈全球性分布[1]。
目前皮膚癬菌藥敏實驗尚無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn),2008年美國國家臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(CLSI)制定的M38-A2方案[6],其中包含皮膚癬菌。本研究參照該方案及相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行鹽酸小檗堿標(biāo)準(zhǔn)品(純度為97%)體外聯(lián)合常用抗真菌藥物藥物伊曲康唑,特比萘芬、氟康唑和新型抗真菌藥伏立康唑、卡泊芬凈對紅色毛癬菌進(jìn)行敏感試驗,從而為鹽酸小檗堿聯(lián)合抗真
2、菌藥物治療紅色毛癬菌病提供實驗室依據(jù),并進(jìn)一步探討其體外聯(lián)合抗菌最佳方案及最佳聯(lián)合濃度,指導(dǎo)臨床合理使用抗真菌藥,有效預(yù)防和治療紅色毛癬菌引起的真菌感染性疾病提供依據(jù)。
方法:
1菌株來源:菌株分離自臨床體癬、股癬、手足癬、甲真菌病等患者的病變處,培養(yǎng)并分離出30株紅色毛癬菌,將菌株鑒定后接種于馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基,28℃培養(yǎng)7-10天。
2體外藥敏實驗2.1鹽酸小檗堿及抗真菌藥物單獨藥敏試驗
3、。
2.2鹽酸小檗堿及抗真菌藥物聯(lián)合藥敏試驗:將配置好的鹽酸小檗堿及抗真菌藥的倍比稀釋液各50uL加入96孔酶標(biāo)板的1~10列中。余操作通單獨藥敏試驗。28℃溫箱培養(yǎng),培養(yǎng)7天判讀結(jié)果。
3統(tǒng)計方法:應(yīng)用SPSS16.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。
結(jié)果:
1菌株耐藥情況:實驗選取的30株紅色毛癬菌的菌株中,除伊曲康唑有耐藥株外,特比萘芬、伏立康唑、氟康唑、卡泊芬凈均未發(fā)現(xiàn)耐藥菌株。
4、伊曲康唑耐藥菌株共3株,其中1株分離自股癬,2株來源不詳。
2單獨應(yīng)用鹽酸小檗堿和抗真菌藥物作用于紅色毛癬菌藥敏實驗MIC值結(jié)果:
其中伏立康唑、伊曲康唑與特比萘芬的MIC值較低,鹽酸小檗堿、卡泊芬凈與氟康唑的MIC值較高。六種抗真菌藥MIC值采用多個獨立樣本的Kruskal-wallisH檢驗,P<0.05,有統(tǒng)計學(xué)意義。兩兩比較經(jīng)秩轉(zhuǎn)換后單因素方差分析,P<0.05,各組之間均有顯著統(tǒng)計學(xué)差異。
5、 3抗真菌藥物聯(lián)合鹽酸小檗堿后MIC值結(jié)果:
與鹽酸小檗堿聯(lián)合前比較,伊曲康唑及卡泊芬凈MIC值降低,經(jīng)Wilcoxon秩和檢驗,伊曲康唑差異有統(tǒng)計學(xué)意義,P<0.05,而卡泊芬凈差異無統(tǒng)計學(xué)意義,P>0.05。伏立康唑、氟康唑、特比萘芬MIC值與聯(lián)合前比較,明顯升高,經(jīng)Wilcoxon秩和檢驗,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義,P<0.05。
4鹽酸小檗堿和五種抗真菌藥交叉聯(lián)合作用于紅色毛癬菌藥敏實驗FICI值結(jié)果:
6、
4.1鹽酸小檗堿和不同濃度伊曲康唑聯(lián)合FICI結(jié)果
4.2鹽酸小檗堿和不同濃度特比萘芬聯(lián)合FICI結(jié)果
4.3鹽酸小檗堿與不同濃度伏立康唑聯(lián)合FICI結(jié)果
4.4鹽酸小檗堿和不同濃度氟康唑聯(lián)合FICI結(jié)果
4.5鹽酸小檗堿和不同濃度卡泊芬凈聯(lián)合FICI值結(jié)果
5不同抗真菌藥物與鹽酸小檗堿聯(lián)合所得FIC值結(jié)果比較:
伊曲康唑、特比萘芬、伏立
7、康唑、氟康唑和卡泊芬凈分別和鹽酸小檗堿聯(lián)合所得FIC值結(jié)果依次分別為:FICI≥2所占比例依次分別為:46.7%、50.0%、80.0%、76.7%、33.3%,1≤FICI<2所占比例依次分別為:20.6%、30.0%、10.0%、18.9%、16.7%、6.7%,FICI<1所占比例依次分別為:33.3%、20.0%、10.0%、6.7%、60%,其中鹽酸小檗堿與卡泊芬凈聯(lián)合的協(xié)同作用最強(qiáng),其次依次為伊曲康唑、特比萘芬。經(jīng)Krusk
8、al-wallisH檢驗,X2=41.663,P<0.05,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。采用Nemenyi檢驗進(jìn)一步兩兩比較,伊曲康唑與伏立康唑、氟康唑、卡泊芬凈三個藥物比較P<0.05,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。伊曲康唑與特比萘芬比較P>0.05無統(tǒng)計學(xué)差異。
結(jié)論:
本實驗參照美國國家臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)化研究所(CLSI)制定的M38-A2方案及相關(guān)文獻(xiàn)測定了鹽酸小檗堿和不同濃度的常用抗真菌藥物伊曲康唑、特比萘芬及氟康唑及新
9、抗真菌藥物伏立康唑、卡泊芬凈聯(lián)合體外藥敏實驗,得出以下結(jié)論:
1鹽酸小檗堿與伊曲康唑、特比萘芬、伏立康唑、氟康唑、卡泊芬凈體外均有很好的抗紅色毛癬菌活性。
2伊曲康唑、卡泊芬凈與鹽酸小檗堿聯(lián)合后MIC值明顯降低,協(xié)同作用增強(qiáng),其中以鹽酸小檗堿和伊曲康唑聯(lián)合協(xié)同作用更強(qiáng)。
3氟康唑、伏立康唑與鹽酸小檗堿聯(lián)合后MIC值升高,拮抗作用增強(qiáng)。
4鹽酸小檗堿與低濃度0.0625ug/mL伊曲
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