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
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文檔簡(jiǎn)介
1、【目的】:
建立脊髓半橫斷損傷模型,觀察NT-3聯(lián)合MP及VitC對(duì)大鼠急性脊髓損傷中神經(jīng)再生、減少神經(jīng)元水腫及促使肢體功能恢復(fù)中的作用,為 NT-3聯(lián)合 MP及VitC應(yīng)用于SCI的臨床治療提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【方法】:
1.選擇雌性SD大鼠36只,體重250g~300g。隨機(jī)分為正常組(A組,n=6)、損傷無干預(yù)對(duì)照(B組,即SCI模型組,n=6)組、NT-3組(C組,n=6)、NT-3+MP組(D組,n
2、=6)、NT-3+VitC組(E組,n=6)及NT-3+MP+VitC組(F組,n=6)。術(shù)后1h,用吸附有MP液(其它以此類推)可吸收明膠海綿塊直接覆蓋脊髓切口處。以制作T10脊髓半橫斷損傷模型,造成脊髓半橫斷損傷。
2.用T10脊髓半橫斷損傷模型行蛛網(wǎng)膜下置管,正常組只打開椎板并咬除,在手術(shù)顯微鏡下切開硬脊膜,并置管。對(duì)照組和治療組分別在術(shù)后1h用吸附有MP液(其它以此類推)可吸收明膠海綿塊直接覆蓋脊髓切口處并置管。術(shù)后第
3、一天開始每天給藥同等劑量一次,術(shù)后1周拔管。
3.分別在損傷前和損傷后第1天、第3天、第7天、第2周后、第4周后進(jìn)行BBB評(píng)分。
4.在損傷第4周后處死大鼠,取脊髓標(biāo)本行HE染色、Nissl(尼氏小體)染色以Nestin免疫組化,在光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行觀察脊髓神經(jīng)形態(tài)結(jié)構(gòu)、Nestin表達(dá)以及尼氏小體。所得數(shù)據(jù)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。
【結(jié)果】:
1、Basso Beattieand Br
4、esnahan(BBB)運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分示:大鼠脊髓損傷后,發(fā)現(xiàn)其患肢 BBB評(píng)分值明顯下降,所得評(píng)分傷后當(dāng)天都為0,伴隨著手術(shù)后時(shí)間的改變,其患肢活動(dòng)功能表現(xiàn)出不等程度的恢復(fù),六組中恢復(fù)速度最快是F組(P<0.05),術(shù)后第29天恢復(fù)綜合評(píng)分最高的是F組,而B組的恢復(fù)綜合評(píng)分最低;
2、病理組織學(xué):脊髓損傷后,HE染色B組脊髓損傷側(cè)組織可見明顯萎縮變小,大部分神經(jīng)元細(xì)胞凋亡,尼氏染色殘存尼氏小體稀少,大部分神經(jīng)元尼氏小體幾乎消失
5、;C、D、E組脊髓損傷側(cè)組織較稀疏水腫出血,部分神經(jīng)元細(xì)胞凋亡,尼氏染色見中等密度胞漿尼氏小體;F組脊髓損傷側(cè)組織有少許稀疏水腫出血,小部分神經(jīng)元細(xì)胞凋亡,尼氏染色見殘存尼氏小體較多,與B組相比較,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),與A組相比差別不大(P>0.05)。
3、Nestin免疫組織化學(xué)染色,大鼠脊髓半橫斷損傷后對(duì)損傷發(fā)生的內(nèi)源性的再生修復(fù)是從損傷后開始的,F(xiàn)組白質(zhì)內(nèi)星形膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)Nestin強(qiáng)陽性,與其他幾組相比,N
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