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文檔簡(jiǎn)介
1、第一部分、弱堿性抑癌液的設(shè)計(jì)
目的:盡管目前的癌癥療法在不斷的進(jìn)步,但是癌癥患者經(jīng)過(guò)治療后經(jīng)常引起發(fā)轉(zhuǎn)移,對(duì)于癌癥迫切需要開發(fā)新的合理的療法。這里我們?cè)O(shè)計(jì)了弱堿性抑癌液。
方法:以KCl和NaHCO3為原料,探索mk/mNa以不同比例混合,用蒸餾水配制成500mL溶液,然后pH計(jì)測(cè)量pH值。
結(jié)果:當(dāng)mk/mNa等于6時(shí),即用KCl為24g,NaHCO3為4g,用蒸餾水配制成500mL溶液,此時(shí)溶液的pH值
2、剛好接近7.45。
結(jié)論:WACIL按mk/mNa=6,以NaHCO3、KCl分別為4g和24g,用蒸餾水定容至500mL,充分溶解后過(guò)濾而成。
第二部分、弱堿性抑癌液調(diào)控癌細(xì)胞生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移及消亡的體外實(shí)驗(yàn)研究
目的:測(cè)試WACIL是否調(diào)控癌細(xì)胞的生長(zhǎng)轉(zhuǎn)移及消亡,然后試圖找到可能的調(diào)控機(jī)制。
方法:在體外,我們檢測(cè)WACIL對(duì)三種細(xì)胞株包括子宮頸鱗癌細(xì)胞SiHa、非小細(xì)胞肺鱗癌細(xì)胞H1299以及人乳
3、腺癌細(xì)胞MDA-MB-231的生長(zhǎng)增殖,細(xì)胞周期,細(xì)胞凋亡,侵襲轉(zhuǎn)移的影響。
結(jié)果:WACIL明顯抑制三種細(xì)胞系的生長(zhǎng)增殖,G2/M期細(xì)胞增多,出現(xiàn)G2/M期阻滯,阻止細(xì)胞周期的進(jìn)程。細(xì)胞形態(tài)呈圓狀,細(xì)胞核濃縮,caspase-3活性檢測(cè)增加,線粒體的膜電位降低,細(xì)胞凋亡;活細(xì)胞數(shù)目減少,細(xì)胞膜破裂,發(fā)生消亡現(xiàn)象,癌細(xì)胞遷移明顯減少(P<0.001)。對(duì)目標(biāo)基因的分析,SCCA1、cyclinB1、MMP-2以及MMP-9的m
4、RNA表達(dá)水平下調(diào),Caspase-3的mRNA表達(dá)水平上調(diào);SCCA1、cyclinB1和MMP-2蛋白表達(dá)下調(diào),Caspase-3蛋白表達(dá)上調(diào)。
結(jié)論:弱堿性抑癌液調(diào)控癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移,介導(dǎo)癌細(xì)胞消亡。更重要的是,本研究系統(tǒng)分析弱堿性抑癌液與癌的pH微環(huán)境之間的相互作用機(jī)制,可以發(fā)現(xiàn)改變癌細(xì)胞所處的微環(huán)境的重要性。
第三部分、弱堿性抑癌液對(duì)移植瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的影響的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究
目的:為了在體內(nèi)研究弱堿
5、性抑癌液對(duì)癌細(xì)胞生長(zhǎng)轉(zhuǎn)移的影響,并挖掘潛在的治療意義。
方法:建立MDA-MB-231細(xì)胞植入4周齡的BALB/C裸鼠頸背皮下的模型,觀察弱堿性抑癌液對(duì)裸鼠皮下腫瘤生長(zhǎng)轉(zhuǎn)移的影響。
結(jié)果:體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)處理組的腫瘤生長(zhǎng)較對(duì)照組明顯緩慢;肺組織HE染色未見明顯癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移,而對(duì)照組可見癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移;WACIL還可能有消退腫瘤血管增生的作用。
結(jié)論:在體內(nèi)弱堿性抑癌液可以控制腫瘤的生長(zhǎng),并抑制癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移,對(duì)腫瘤
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