弱堿性抑癌液調(diào)控癌細(xì)胞生長(zhǎng)及消亡的作用研究.pdf

1、第一部分、弱堿性抑癌液的設(shè)計(jì)
　　目的:盡管目前的癌癥療法在不斷的進(jìn)步，但是癌癥患者經(jīng)過(guò)治療后經(jīng)常引起發(fā)轉(zhuǎn)移，對(duì)于癌癥迫切需要開發(fā)新的合理的療法。這里我們?cè)O(shè)計(jì)了弱堿性抑癌液。
　　方法:以KCl和NaHCO3為原料，探索mk/mNa以不同比例混合，用蒸餾水配制成500mL溶液，然后pH計(jì)測(cè)量pH值。
　　結(jié)果:當(dāng)mk/mNa等于6時(shí)，即用KCl為24g，NaHCO3為4g，用蒸餾水配制成500mL溶液，此時(shí)溶液的pH值

2、剛好接近7.45。
　　結(jié)論:WACIL按mk/mNa=6，以NaHCO3、KCl分別為4g和24g，用蒸餾水定容至500mL，充分溶解后過(guò)濾而成。
　　第二部分、弱堿性抑癌液調(diào)控癌細(xì)胞生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移及消亡的體外實(shí)驗(yàn)研究
　　目的:測(cè)試WACIL是否調(diào)控癌細(xì)胞的生長(zhǎng)轉(zhuǎn)移及消亡，然后試圖找到可能的調(diào)控機(jī)制。
　　方法:在體外，我們檢測(cè)WACIL對(duì)三種細(xì)胞株包括子宮頸鱗癌細(xì)胞SiHa、非小細(xì)胞肺鱗癌細(xì)胞H1299以及人乳

3、腺癌細(xì)胞MDA-MB-231的生長(zhǎng)增殖，細(xì)胞周期，細(xì)胞凋亡，侵襲轉(zhuǎn)移的影響。
　　結(jié)果:WACIL明顯抑制三種細(xì)胞系的生長(zhǎng)增殖，G2/M期細(xì)胞增多，出現(xiàn)G2/M期阻滯，阻止細(xì)胞周期的進(jìn)程。細(xì)胞形態(tài)呈圓狀，細(xì)胞核濃縮，caspase-3活性檢測(cè)增加，線粒體的膜電位降低，細(xì)胞凋亡;活細(xì)胞數(shù)目減少，細(xì)胞膜破裂，發(fā)生消亡現(xiàn)象，癌細(xì)胞遷移明顯減少(P＜0.001)。對(duì)目標(biāo)基因的分析，SCCA1、cyclinB1、MMP-2以及MMP-9的m

4、RNA表達(dá)水平下調(diào)，Caspase-3的mRNA表達(dá)水平上調(diào);SCCA1、cyclinB1和MMP-2蛋白表達(dá)下調(diào)，Caspase-3蛋白表達(dá)上調(diào)。
　　結(jié)論:弱堿性抑癌液調(diào)控癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移，介導(dǎo)癌細(xì)胞消亡。更重要的是，本研究系統(tǒng)分析弱堿性抑癌液與癌的pH微環(huán)境之間的相互作用機(jī)制，可以發(fā)現(xiàn)改變癌細(xì)胞所處的微環(huán)境的重要性。
　　第三部分、弱堿性抑癌液對(duì)移植瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的影響的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究
　　目的:為了在體內(nèi)研究弱堿

5、性抑癌液對(duì)癌細(xì)胞生長(zhǎng)轉(zhuǎn)移的影響，并挖掘潛在的治療意義。
　　方法:建立MDA-MB-231細(xì)胞植入4周齡的BALB/C裸鼠頸背皮下的模型，觀察弱堿性抑癌液對(duì)裸鼠皮下腫瘤生長(zhǎng)轉(zhuǎn)移的影響。
　　結(jié)果:體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)處理組的腫瘤生長(zhǎng)較對(duì)照組明顯緩慢;肺組織HE染色未見明顯癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移，而對(duì)照組可見癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移;WACIL還可能有消退腫瘤血管增生的作用。
　　結(jié)論:在體內(nèi)弱堿性抑癌液可以控制腫瘤的生長(zhǎng)，并抑制癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移，對(duì)腫瘤