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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
前列腺炎特別是慢性前列腺炎是泌尿外科門診常見(jiàn)的疾病,至今大多數(shù)慢性前列腺炎的病因尚不清楚,療效也不甚令人滿意,因此困擾著廣大患者甚至泌尿外科醫(yī)師,龐大的患者人群及高昂的治療費(fèi)用同時(shí)給公共衛(wèi)生事業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。慢性前列腺炎多發(fā)于青壯年男性,其中大部分為慢性非細(xì)菌性前列腺炎,此病常表現(xiàn)為排尿異常、局部疼痛、精神癥狀及性功能障礙等,尤以排尿異常癥狀常見(jiàn)。本實(shí)驗(yàn)旨在通過(guò)對(duì)雄性SD大鼠皮下注射17β-雌二醇聯(lián)合去勢(shì)的方法造
2、成慢性非細(xì)菌性前列腺炎模型,繼而觀察慢性細(xì)菌性前列腺炎對(duì)大鼠膀胱逼尿肌相關(guān)蛋白的影響,探索其對(duì)于臨床的意義。
方法:
健康雄性SD大鼠60只,體重250~350g,隨機(jī)分為6組:空白對(duì)照組(n=10)、生理鹽水組(n=10)、假手術(shù)組(n=10)、單純?nèi)?shì)組(n=10)、單純雌二醇組(n=10)、聯(lián)合去勢(shì)組(n=10)。空白對(duì)照組不給予任何處理,生理鹽水組僅皮下注射生理鹽水30天,假手術(shù)組僅在無(wú)菌條件下切開(kāi)陰囊皮膚,
3、不行去勢(shì)手術(shù),單純?nèi)?shì)組僅行單純睪丸切除術(shù),單純雌二醇組僅皮下注射17β-雌二醇(0.25 mg/2 ml/kg)30天,聯(lián)合去勢(shì)組行去勢(shì)手術(shù)聯(lián)合17β-雌二醇皮下注射30天處理。在無(wú)菌條件下取出大鼠前列腺及膀胱組織,仔細(xì)剝除前列腺包膜及周圍的脂肪、結(jié)締組織等,獲得無(wú)菌的前列腺及膀胱組織,前列腺組織放置入10%甲醛后石蠟包埋切片以供HE染色,然后使用光鏡觀察以評(píng)估組織炎癥情況,驗(yàn)證造模是否成功。膀胱組織放置-80℃冰箱以供后續(xù)實(shí)驗(yàn)。采用
4、S-P免疫組化及Western blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)6組大鼠膀胱組織中肌動(dòng)蛋白(α-actin)、肌球蛋白(myosin light chain2,MLC2)及高分子量鈣調(diào)素結(jié)合蛋白(h-caldesmon,h-cad)表達(dá)的差異。
結(jié)果:
1、聯(lián)合去勢(shì)組大鼠成功造成慢性無(wú)菌性前列腺炎模型,單純?nèi)?shì)組、單純雌二醇組大鼠前列腺腺體均有輕微炎癥改變,空白對(duì)照組、生理鹽水組、假手術(shù)組大鼠前列腺腺體均無(wú)炎癥改變。
2、
5、免疫組化結(jié)果顯示單純?nèi)?shì)組、單純雌二醇組α-actin、MLC2、h-cad蛋白表達(dá)水平高于空白對(duì)照組、生理鹽水組、假手術(shù)組(P<0.05),聯(lián)合去勢(shì)組α-actin、MLC2、h-cad蛋白表達(dá)水平顯著高于其余各組(P<0.01)。
3、Western blot結(jié)果顯示α-actin在各組的表達(dá),與空白對(duì)照組相比,生理鹽水組、假手術(shù)組、單純17β-雌二醇組、單純?nèi)?shì)組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,聯(lián)合去勢(shì)組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。MLC2、h-cad
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