藥用真菌豬苓菌核共生蜜環(huán)菌類群的研究.pdf

1、豬苓Polyporus umbellatus(Pers.)Ft.，為大型真菌，廣泛分布于中國、日本和北半球其他的溫帶區(qū)域。豬苓菌核入藥在我國已有2000多年的歷史，具有利水滲濕的功效，為我國歷次藥典所收錄。目前對豬苓的需求多依賴野生資源，隨著臨床和市場需求的不斷增加，其野生資源急劇減少。已有研究表明，豬苓的生長離不開蜜環(huán)菌，其生長所需的營養(yǎng)主要靠蜜環(huán)菌提供;然而人們對豬苓菌核共生的蜜環(huán)菌類群還知之甚少，因此人工栽培豬苓的過程中，由于蜜環(huán)

2、菌來源較雜、種類不明，可能對豬苓的產(chǎn)量和質(zhì)量造成嚴重影響。由此可見，了解豬苓菌核共生蜜環(huán)菌的種性特征，已成為科研工作和生產(chǎn)實踐中所急需解決的問題。在本論文中，我們從全國范圍內(nèi)收集野生豬苓菌核，從中分離蜜環(huán)菌菌株，對所有蜜環(huán)菌菌株進行分子鑒定，并對其培養(yǎng)特性進行研究，同時對豬苓菌核和蜜環(huán)菌的相關(guān)性進行分析，主要研究結(jié)果如下：
　　1、共從全國11個省份采集到48份野生豬苓樣品，從其中26份樣品中成功分離出47株蜜環(huán)菌。擴增其ITS、

3、β-tubulin和elongation factor-1alpha三種序列，與中國蜜環(huán)菌的類群進行比較，46個菌株可劃歸至5個系統(tǒng)發(fā)育支系(lineage)：lineage6、lineage4、lineage8、lineage1和Armillaria cepistipes，其中l(wèi)ineage8為本研究中新確認的支系;另有1個菌株目前還不能確定其分類地位。
　　2、分析了豬苓的系統(tǒng)進化與蜜環(huán)菌系統(tǒng)進化的相關(guān)性。
　　結(jié)果顯示

4、親緣關(guān)系越近的豬苓類群更傾向于與親緣關(guān)系越近的蜜環(huán)菌共生;蜜環(huán)菌的系統(tǒng)發(fā)育信號影響了豬苓-蜜環(huán)菌互作網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的形成，即蜜環(huán)菌的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系介導(dǎo)了豬苓與蜜環(huán)菌共生關(guān)系形成過程中的相互選擇。
　　3、為了明確蜜環(huán)菌是否與豬苓的主要成分含量存在相關(guān)性，對不同產(chǎn)地豬苓菌核的多糖和麥角甾醇的含量進行了測定，結(jié)果顯示不同地域來源的豬苓菌核，其多糖和麥角甾醇的含量有明顯差異。以豬苓的遺傳距離、蜜環(huán)菌的系統(tǒng)發(fā)育型以及豬苓生境中全N、全P、全K和有

5、機質(zhì)含量為影響因子進行冗余分析，結(jié)果顯示豬苓多糖的含量與土壤全N、全P以及有機質(zhì)有一定的相關(guān)性，而麥角甾醇的含量則與土壤全N、全P、有機質(zhì)以及豬苓的遺傳距離有一定的相關(guān)性，未發(fā)現(xiàn)蜜環(huán)菌的系統(tǒng)發(fā)育型與豬苓的主要成分含量之間存在明顯的相關(guān)性。
　　4、為了明確豬苓與天麻共生蜜環(huán)菌的異同，本研究對豬苓菌核與天麻共生蜜環(huán)菌的類群進行了對比分析。
　　結(jié)果表明，豬苓和天麻共生的蜜環(huán)菌共分為10個clade，其中和豬苓共生的蜜環(huán)菌有6個

6、clade，和天麻共生的蜜環(huán)菌有7個clade，有3個clade的蜜環(huán)菌既可以和天麻共生，也可和豬苓共生。在這3個共同類群中，菌株來自于陜西、山西、吉林、黑龍江、貴州、甘肅和四川幾個省份。西藏、云南等地的蜜環(huán)菌則具有較高的專一性。
　　5、本研究中所獲得的蜜環(huán)菌依據(jù)主要的表型性狀可劃分為8個不同的形態(tài)型，分別為morphotype A-H。其中形態(tài)型F包含菌株最多，其次是形態(tài)型B和形態(tài)型E。綜合形態(tài)型和前期分子類群的劃分，共選出1