殼聚糖固定化過(guò)氧化氫酶在清除卷煙煙氣自由基等有害物質(zhì)中的應(yīng)用.pdf_第1頁(yè)
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1、過(guò)氧化氫酶是一種重要的抗氧化酶,對(duì)羥基自由基、超氧陰離子等自由基具有較好的清除能力。本論文以殼聚糖固定化過(guò)氧化氫酶提高過(guò)氧化氫酶的穩(wěn)定性及其在卷煙濾嘴生產(chǎn)中添加的可操作性,從而達(dá)到以過(guò)氧化氫酶清除卷煙煙氣中自由基的目的。主要的研究?jī)?nèi)容與結(jié)果如下: 1.確定了殼聚糖固定化過(guò)氧化氫酶的固定化方案,對(duì)固定化過(guò)程進(jìn)行了優(yōu)化。固定化的最優(yōu)條件為:酶液(過(guò)氧化氫酶酶活2×104CIU/ml):3%殼聚糖溶液:交聯(lián)劑=6∶20∶100(v∶v

2、∶v),乙二醛濃度6%(w/v),吸附時(shí)間0.5h,交聯(lián)時(shí)間2.5h。 2.對(duì)固定化過(guò)氧化氫酶的性質(zhì)進(jìn)行了初步的研究:紅外分析結(jié)果說(shuō)明過(guò)氧化氫酶完成了交聯(lián)反應(yīng);固定化過(guò)氧化氫酶的米氏常數(shù)Km從游離酶的30.3mmol/L增加到61.7mmol/L,固定化酶對(duì)過(guò)氧化氫的親和性明顯下降;最適pH值為7.0,且在5-9范圍均保持較高的酶活;其熱穩(wěn)定性和貯藏穩(wěn)定性均得到了提高。 3.以紫外光-TiO2催化自由基產(chǎn)生體系初步考察了

3、過(guò)氧化氫酶清除自由基的能力。活性過(guò)氧化氫酶對(duì)紫外光-TiO2催化體系產(chǎn)生的自由基幾乎能完全清除,而熱滅活的過(guò)氧化氫酶對(duì)此體系的自由基幾乎不能清除。說(shuō)明只有具有活性的過(guò)氧化氫酶具有清除自由基的能力。 4.固定化過(guò)氧化氫酶對(duì)鄰苯三酚體系產(chǎn)生的自由基同樣有清除作用,9ml0.2mmol/L鄰苯三酚溶液中,當(dāng)加入固定化過(guò)氧化氫酶0.08g時(shí),對(duì)其自氧化達(dá)到50%抑制。 5.以殼聚糖固定化過(guò)氧化氫酶為一種卷煙濾嘴添加劑,研究其去除

4、主流煙氣中自由基的效果。當(dāng)濾嘴中固定化過(guò)氧化氫酶添加量分別是10、30、50mg/支時(shí),氣相自由基分別減少了6.5%、9.9%和15.1%;固相自由基分別減少2.3%、21.9%和40.8%。 6.采用機(jī)械干法添加的方式可以提高固定化過(guò)氧化氫酶對(duì)自由基的清除效率。10mg/支的機(jī)械干法添加的清除自由基效果為:氣相自由基下降35%,固相自由基下降22.4%。 7.考察了殼聚糖固定化過(guò)氧化氫酶對(duì)卷煙中其他有害物質(zhì)的去除效果,

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