補陽還五湯有效部位抗大鼠血管內膜增生及VSMC增殖的研究.pdf

1、目的：在成功復制大鼠主動脈內膜增生模型的基礎上，通過研究補陽還五湯及其有效部位生物堿和苷對大鼠主動脈內膜損傷后的血管形態(tài)學變化、VSMC增殖標記物PCNA表達和增殖相關的周期蛋白cyclinD1、cyclinE表達的影響，探討該方抗VSMC增殖的物質基礎，揭示其抗VSMC增殖的細胞周期調控機制。
　　 方法：
　　 1.采用國產2.0F球囊導管建立大鼠主動脈內膜剝脫模型，分別用組織形態(tài)學和免疫組織化學方法，測定大鼠血管內

2、皮剝脫后內膜增生情況及SMα-actin、PCNA及collagen I的表達活性，探討該模型的特性。
　　 2.將大鼠隨機分為七組，即：假手術組、模型組、生物堿組、苷組、補陽還五湯原方組、三七總皂苷組、阿托伐他汀組，以球囊導管損傷血管內膜造模，造模后第二天開始灌胃給藥，連續(xù)給藥14 天。術后第16 天取胸主動脈血管損傷段，分別測定血管形態(tài)計量指標及PCNA、cyclinD1和cyclinE的表達。
　　 結果：

3、　　 1. 采用國產球囊導管反復3 次剝脫大鼠胸腹主動脈，術后14d 內膜增生明顯，SMα-actin 及PCNA 表達均明顯增強(均P＜0.01)；術后21d 內膜呈進行性彌漫性增生，SMα-actin 表達仍明顯增高(P＜0.01)，但PCNA 表達不明顯。模型7d、14d、21d 組collagen I 表達與假手術組比較，差異均無顯著性意義(P＞0.05)。
　　 2. 采用國產球囊導管反復6 次剝脫大鼠胸腹主動脈，術

4、后第16 天內膜即出現(xiàn)顯著增生。各組血管形態(tài)學變化：假手術組大鼠主動脈壁各層結構完整，管腔面積無縮小，內膜光滑無增生，中膜VSMC 排列整齊；模型組大鼠胸主動脈內膜呈彌漫性增厚，管腔面積明顯縮小，增厚的內膜中以VSMC 為主，中膜細胞排列紊亂；補陽還五湯原方組、生物堿組、苷組、阿托伐他汀組、三七總皂苷組內膜均有增生，管腔口徑有不同程度縮小，但增生程度明顯輕于模型組。
　　 血管形態(tài)計量指標分析表明，各組中膜面積和中膜厚度均無顯著

5、變化(P＞0.05)。模型組的內膜面積、內膜厚度、內膜面積增生比率、內膜厚度增生比率、內膜/中膜面積比、內膜/中膜厚度比均顯著大于假手術組(P＜0.01)；生物堿組、苷組、補陽還五湯原方組、三七總皂苷組、阿托伐他汀組的內膜面積、內膜厚度、內膜面積增生比率、內膜厚度增生比率、內膜/中膜面積比、內膜/中膜厚度比均顯著低于模型組(P＜0.01~ P＜0.05)。
　　 各組增生內膜PCNA 表達的比較：模型組PCNA 表達較假手術組顯

6、著增強(P＜0.01)。生物堿組、苷組、三七總皂苷組、阿托伐他汀組PCNA 表達較假手術組也均顯著增強(P＜0.01~ P＜0.05)，但均顯著低于模型組(P＜0.01)。
　　 而補陽還五湯原方組PCNA 表達顯著高于假手術組(P＜0.01)，其表達強度雖略低于模型組，但差異無顯著性意義(P＞0.05)。
　　 各組增生內膜cyclinD1和cyclinE表達的比較：模型組cyclinD1表達較假手術組均顯著增強(P＜

7、0.01)；生物堿組、苷組、補陽還五湯原方組、三七總皂苷組、阿托伐他汀組cyclinD1表達均顯著低于模型組(P＜0.05～P＜0.01)。模型組cyclinE表達較假手術組顯著增強(P＜0.01)。生物堿組、苷組、三七總皂苷組cyclinE表達均顯著低于模型組(P＜0.05～P＜0.01)。而補陽還五湯原方組、阿托伐他汀組cyclinE表達強度雖略低于模型組，但差異無顯著性意義(P＞0.05)。
　　 結論：國產2.0F球囊導

8、管致大鼠主動脈內皮剝脫術后14～21d可出現(xiàn)明顯的血管內膜增生引起的血管再狹窄。增生內膜中PCNA、cyclinD1、cyclinE表達均增強，其內膜增生主要是由于VSMC增殖所致。在造模術后第十六天, 補陽還五湯及其兩類有效部位生物堿和苷能顯著抑制血管內膜增生，抑制PCNA、cyclinD1和cyclinE的表達，通過阻抑細胞周期的啟動而抗VSMC的增殖，從而起到抑制血管內膜增生的作用。且由補陽還五湯提取的兩類有效部位的抗血管內膜增生