補(bǔ)陽(yáng)還五湯對(duì)膿毒癥大鼠脾臟免疫功能影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討補(bǔ)陽(yáng)還五湯在改善膿毒癥大鼠脾臟免疫功能中的作用，為中西醫(yī)結(jié)合治療膿毒癥提供依據(jù)和線索。 方法：選用健康雄性Wistar大鼠180只，按隨機(jī)數(shù)字表法分為假手術(shù)組、模型組、補(bǔ)陽(yáng)還五湯（Buyanghuanwutang，BYHWT）治療組和BYHWT防治組。每組動(dòng)物按處死時(shí)點(diǎn)不同（6、12、24、48、96小時(shí)）再各分為5小組。采用盲腸結(jié)扎穿孔法（cecal ligation and puncture，CLP）復(fù)制膿毒癥大鼠

2、模型。BYHWT治療組動(dòng)物造模后每日給予補(bǔ)陽(yáng)還五湯灌服，BYHWT防治組動(dòng)物術(shù)前3天即開(kāi)始每日給予補(bǔ)陽(yáng)還五湯灌服。各小組動(dòng)物相應(yīng)時(shí)點(diǎn)經(jīng)腹腔靜脈取血后活殺動(dòng)物取脾臟。采用內(nèi)毒素檢測(cè)儀檢測(cè)各組動(dòng)物各時(shí)點(diǎn)血清內(nèi)毒素水平，采用HE染色光學(xué)顯微鏡觀察各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物脾臟形態(tài)學(xué)改變，采用免疫組化法檢測(cè)各組動(dòng)物各時(shí)點(diǎn)脾臟CD3+T、CD4+T、CD8+T淋巴細(xì)胞及B淋巴細(xì)胞的水平，TUNEL法檢測(cè)各組大鼠各時(shí)點(diǎn)脾臟細(xì)胞凋亡的情況。應(yīng)用image pro

3、plus6.0圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行圖像采集及分析。 結(jié)果：CLP術(shù)后大鼠的脾臟在光鏡下觀察可見(jiàn)白髓逐漸萎縮，淋巴小結(jié)破壞，這種表現(xiàn)的嚴(yán)重程度為模型組>：BYHWT治療組>BYHWT防治組。TUNEL染色發(fā)現(xiàn)凋亡細(xì)胞首先出現(xiàn)于脾小體，隨后動(dòng)脈周圍淋巴鞘亦可見(jiàn)。CLP術(shù)后，模型組、BYHWT治療組、BYHWT防治組大鼠各時(shí)點(diǎn)血清內(nèi)毒素水平均較假手術(shù)組明顯增高（p<0.01）；術(shù)后24小時(shí)開(kāi)始，BYHWT治療組血清內(nèi)毒素水平即顯著低于模型

4、組（p<0.01）；術(shù)后12小時(shí)開(kāi)始，BYHWT防治組血清內(nèi)毒素水平即顯著低于模型組（p<0.01）；術(shù)后24小時(shí)開(kāi)始，BYHWT防治組血清內(nèi)毒素水平即低于BYHWT治療組（p<0.05）。CLP術(shù)后6小時(shí)開(kāi)始，模型組、BYHWT治療組、BYHWT防治組大鼠脾臟CD3+T、CD4+T淋巴細(xì)胞以及B淋巴細(xì)胞水平均較假手術(shù)組明顯降低（p<0.01），而各組CD8+T淋巴細(xì)胞與假手術(shù)組比較，始終無(wú)明顯變化（p>0.05）；CLP術(shù)后24小時(shí)開(kāi)

5、始，BYHWT治療組大鼠脾臟CD3+T、CD4+T淋巴細(xì)胞以及B淋巴細(xì)胞水平均顯著高于模型組（p<0.01）；CLP術(shù)后6小時(shí)開(kāi)始，BYHWT防治組大鼠脾臟CD3+T、CD4+T淋巴細(xì)胞以及B淋巴細(xì)胞水平均高于模型組（p<0.01或p<0.05）；術(shù)后6小時(shí)開(kāi)始，BYHWT防治組大鼠脾臟CD3+T、CD4+T淋巴細(xì)胞以及B淋巴細(xì)胞水平均高于BYHWT治療組（p<0.01或p<0.05）。CLP術(shù)后，模型組、BYHWT治療組、BYHWT防

6、治組大鼠各時(shí)點(diǎn)脾細(xì)胞凋亡均較假手術(shù)組明顯增高（p<0.01）；術(shù)后6小時(shí)開(kāi)始，BYHWT治療組和BYHWT防治組的脾細(xì)胞凋亡水平即顯著低于模型組（p<0.01）；術(shù)后6小時(shí)開(kāi)始，BYHWT防治組脾細(xì)胞凋亡水平即低于BYHWT治療組（p<0.05）。 結(jié)論：1、膿毒癥大鼠血清內(nèi)毒素水平明顯增高、脾臟CD3+T、CD4+T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞數(shù)目減少，脾臟細(xì)胞凋亡顯著增加；2、補(bǔ)陽(yáng)還五湯能有效降低膿毒癥大鼠血清內(nèi)毒素水平，減少脾臟細(xì)