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1、目的:觀察補(bǔ)陽(yáng)還五湯對(duì)實(shí)驗(yàn)性糖尿病大鼠血糖(FBG)、一氧化氮(NO)、尿蛋白(Upro)、細(xì)胞間黏附分子-1(ICAM-1)、血管細(xì)胞黏附分子-1(VCAM-1)等指標(biāo)的影響,探討益氣活血方藥對(duì)糖尿病腎損傷的保護(hù)作用,從而為該方的臨床應(yīng)用提供科學(xué)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:將清潔級(jí)雄性SD大鼠100只,適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后,分為對(duì)照組和造模組。對(duì)照組喂養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)飼料,造模組喂以高糖高脂飼料,喂養(yǎng)4周后,禁食12小時(shí),采用腹腔注射小劑量鏈
2、脲佐菌素復(fù)制糖尿病模型。依據(jù)“勞則氣耗”的中醫(yī)理論,將造模組大鼠每天在水溫(37±0.5)℃,深45cm水桶中游泳,待下沉?xí)r撈出,連續(xù)2周造成模型大鼠氣虛,對(duì)照組大鼠適度游泳。后將成模大鼠分為模型組(M)、二甲雙胍組(D)、補(bǔ)陽(yáng)還五湯組(B)、中西藥結(jié)合組(I),加對(duì)照組(C)共分五組。灌胃給藥8周,于第8周末留取各組大鼠24小時(shí)尿液,用于尿蛋白測(cè)定。最后一次給藥后,禁食12小時(shí),稱重,斷頭取血,分離血清及血漿,測(cè)空腹血糖、一氧化氮。無(wú)
3、菌操作取左腎,稱重,計(jì)算腎重/體重指數(shù)(kidney weight/body weight,KW/BW),固定腎組織,以備腎臟病理形態(tài)學(xué)觀察和免疫組化檢測(cè)。
結(jié)果:⑴M組大鼠FBG高于C組(P<0.01);三治療組與M組比較FBG明顯降低(P<0.01),I組FBG與D組、B組比較有顯著差異(P<0.05、P<0.01)。⑵治療開始時(shí),除C組外其余各組間無(wú)顯著性差異(P>0.05);用藥4、8周后:三治療組與M組比較大鼠體
4、重明顯減輕,差異顯著(P<0.05、P<0.01);I組大鼠體重較B組、D組減輕(P<0.05、P<0.01)。⑶M組大鼠24小時(shí)尿蛋白較C組顯著增高(P<0.01);三治療組24小時(shí)尿蛋白較M組明顯降低(P<0.01),I組較B組、D組有顯著差異(P<0.05、P<0.01)。⑷M組大鼠NO較C組顯著增高(P<0.01);三治療組NO較M組明顯降低(P<0.01),I組較D組有統(tǒng)計(jì)學(xué)著差異(P<0.05),I組較B組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)著差異(P
5、>0.05)。⑸HE染色光鏡下可見:正常組(C組):腎小管排列整齊,腎小球毛細(xì)血管叢未見擴(kuò)張,系膜細(xì)胞未見增生;模型組(M組)腎小管上皮細(xì)胞變性,水腫,脫落,腎小球肥大,系膜細(xì)胞增多;三治療組(D組、B組、I組)較模型組(M組)腎小管上皮細(xì)胞損傷顯著減輕。⑹ICAM-1在C組腎組織中僅微弱表達(dá),而ICAM-1在M組(0.2761±0.0419)與C組(0.0334±0.0248)差異顯著(P<0.01),三治療組(D:0.2085±0.
6、0232、B:0.1678±0.0346、I:0.1252±0.0283)與M組比較有顯著性差異(P<0.01),I組ICAM-1表達(dá)與D組、B組比較有顯著差異(P<0.01)。
結(jié)論:①采用過勞、高脂飲食結(jié)合小劑量注射鏈脲佐菌素成功復(fù)制糖尿病大鼠模型,此種糖尿病大鼠存在NO、ICAM-1、VCAM-1的表達(dá)異常。②補(bǔ)陽(yáng)還五湯能夠降低腎重指數(shù),減少尿蛋白的丟失,減輕蛋白尿?qū)δI臟損害。③補(bǔ)陽(yáng)還五湯能夠降低一氧化氮含量,減輕其
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