不同濃度醫(yī)用臭氧對大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞影響的體外觀察.pdf

1、目的：體外培養(yǎng)大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞(Ast)并觀察在不同濃度醫(yī)用臭氧(O2-O3)作用后細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平及乳酸脫氫酶(LDH)漏出率、死亡細(xì)胞百分比的變化，探討較短時間內(nèi)醫(yī)用臭氧對大鼠Ast功能及形態(tài)的影響，評價醫(yī)用臭氧的神經(jīng)毒性。 方法：參照McCarthy和Dvdlis的方法，通過胰酶消化、差速培養(yǎng)、傳代純化等技術(shù)體外培養(yǎng)大鼠Ast并進行鼠抗膠原纖維酸性蛋白(GFAP)免疫細(xì)胞化學(xué)鑒

2、定；大鼠Ast傳代接種入24孔培養(yǎng)板，分為7組(n=7)：空白對照組(C組)，不加干預(yù)；純氧組(O2組)：加入400μL，純氧作用20min后的完全培養(yǎng)基；醫(yī)用臭氧O2-O310組、O2-O320組、O2-O340組、O2-O360組、O2-O380組分別加入400μL，的10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、60μg/mL、80μg/mL醫(yī)用臭氧作用20min后的完全培養(yǎng)基，分別于2h、4h時點觀察細(xì)胞形態(tài)、收集細(xì)胞懸液及破

3、碎細(xì)胞后黃嘌呤氧化酶法測定細(xì)胞SOD水平、硫代巴比妥酸法測定細(xì)胞MDA水平、簡易測定法測定細(xì)胞LDH漏出率、臺盼蘭染色計數(shù)死亡細(xì)胞百分比。 結(jié)論：在較短時間內(nèi)(2h，4h)，濃度為10μg/mL的醫(yī)用臭氧作用后，大鼠Ast功能形態(tài)未發(fā)生明顯變化；濃度為20μg/ml、40μg/mL的醫(yī)用臭氧使大鼠Ast的SOD活力升高、LDH漏出率降低，提示對大鼠Ast有一定保護作用；濃度為60μg/mL、80μg/mL的醫(yī)用臭氧使大鼠Ast的