不同濃度阿托伐他汀對(duì)大鼠骨髓來(lái)源內(nèi)皮祖細(xì)胞體外培養(yǎng)的影響.pdf

1、[目的]
　　 研究不同濃度的阿托伐他汀對(duì)于大鼠骨髓來(lái)源的內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelial progenitor cell，EPC)體外生長(zhǎng)培養(yǎng)的影響。
　　 [方法]
　　 取體重約80g的SD大鼠四肢長(zhǎng)骨骨髓，用密度梯度離心法結(jié)合差異貼壁法提取單核細(xì)胞，用免疫熒光法檢測(cè)提取的單核細(xì)胞的生物學(xué)標(biāo)志，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)其表面標(biāo)志物陽(yáng)性表達(dá)率，分對(duì)照組和4個(gè)不同阿托伐他汀濃度組(0.01μmol/L、0.1μmol/

2、L、1μmol/L、10μmol/L)培養(yǎng)后，光鏡下觀察和四甲基偶氮唑鹽法(MTT)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況；應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)EPCs的凋亡率；通過(guò)測(cè)定一氧化氮(NO)和內(nèi)皮細(xì)胞型一氧化氮合酶(eNOS)的活性，間接反映EPCs的分泌功能。
　　 [結(jié)果]
　　 ①顯微鏡下可看到細(xì)胞形態(tài)的改變，3d多為圓形細(xì)胞，并開(kāi)始出現(xiàn)梭形細(xì)胞，7d梭形細(xì)胞增加成團(tuán)，14d出現(xiàn)典型的“鵝卵石”形態(tài)；②免疫熒光檢測(cè)可見(jiàn)細(xì)胞生物標(biāo)志，CD133

3、、FLK-1、CD31、vWF在7d，14d，21d，均有表達(dá)；③流式細(xì)胞術(shù)下，表達(dá)率分別為7dvWF：31.6％，cd133:91.9％；14dvWF：90.6％，cd133:49％；21dvWF：99.1％，cd133:29.4％；④不同濃度阿托伐他汀組的生長(zhǎng)曲線：對(duì)照組和各藥物濃度組(0.01μmol/L、0.1μmol/L、1μmol/L)細(xì)胞都表現(xiàn)為增長(zhǎng)，1μmol/L組增長(zhǎng)最明顯，而10μmol/L組1-7d表現(xiàn)為增長(zhǎng)，7d

4、后出現(xiàn)增長(zhǎng)的減少；⑤1.0μmol/L(3.1％)組凋亡率低于0.01μmol/L(6.5％)組和0.1μmol/L(5.2％)，對(duì)照組(8.3％)(p<0.01)，10μmol/L凋亡率(13.4％)高于對(duì)照組(8.3％)，0.01μmol/L(6.5％)組和0.1μmol/L(5.2％)，1.0μmol/L(3.1％)(p<0.01)；⑥1μmol/L濃度的阿托伐他汀組細(xì)胞增殖能力明顯優(yōu)于其余各組(P<0.01)，10μmol/L組

5、低于各藥物組(P<0.01)，0.01μmol/L與0.1μmol/L組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)；⑦NO含量：0.01μmol/L，0.1μmol/L和1.0μmol/L組明顯高于正常對(duì)照組(P<0.01)，10μmol/L組NO明顯低于其余各組(P<0.01)，0.01μmol/L與0.1μmol/L組間比較無(wú)明顯差別(p>0.05)；⑧eNOS活性：0.01μmol/L，0.1μmol/L和1.0μmol/L組明顯高于

6、正常對(duì)照組(P<0.01)，10μmol/L組明顯低于其余各組(P<0.01)，0.01μmol/L與0.1μmol/L組間比較差異無(wú)顯著性意義(p>0.05)。
　　 [結(jié)論]
　　 阿托伐他汀對(duì)EPCs的保護(hù)作用最適合的濃度為1μmol/L，阿托伐他汀可提高EPCs的數(shù)量和減少內(nèi)皮祖細(xì)胞凋亡，增加NO、eNOS合成，促進(jìn)細(xì)胞增殖能力等功能，10μmol/L濃度的阿托伐他汀對(duì)EPCs的生長(zhǎng)有抑制作用，提示高濃度的阿托伐