阿托伐他汀對(duì)腎大部分切除大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞動(dòng)員及其對(duì)殘腎的修復(fù)作用.pdf

1、目的：探討阿托伐他汀是否動(dòng)員5/6腎切除大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞到殘余腎臟參與其修復(fù)及其可能機(jī)制。
　　 方法：將32只雄性SD大鼠隨機(jī)分為4組：假手術(shù)組(contro1)、腎大部分切除組(model)、腎大部切除加小劑量阿托伐他汀(8mg·kg-1·d-1)治療組(LD)、腎大部切除加大劑量阿托伐他(16mg·kg-1·d-1)治療組(HD)。阿托伐他汀治療8周后，采用密度梯度離心法從外周血中獲得單核細(xì)胞，將其接種在人纖連蛋白包被的培養(yǎng)

2、板上，M199培養(yǎng)七天的貼壁細(xì)胞供試驗(yàn)用，觀察細(xì)胞形態(tài)并計(jì)數(shù)，通過流式檢測(cè)細(xì)胞表面標(biāo)記CD34，CD133和KDR(VEGFR-2)以及免疫熒光檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)吞UEA-1和結(jié)合acLDL來鑒定EPCs，并檢測(cè)EPCs增值、粘的能力。用免疫組化檢測(cè)腎組織CD34+細(xì)胞數(shù)目、腎小球CAP內(nèi)皮細(xì)胞密度，用RT-PCR檢測(cè)腎組織eNOS、ET1、TGF-β、COLⅣ mRNA的表達(dá)，用HE、PAS、天狼猩紅膠原染色檢測(cè)殘腎組織病理改變，并檢測(cè)Scr

3、、BUN、尿蛋白、膽固醇(TCHO)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、肌酸激酶(CK)。
　　 結(jié)果：用激光共聚焦顯微鏡顯示分離、純化的細(xì)胞DiI-acLDL和FITC-UEA-1呈免疫雙熒光陽(yáng)性；流式細(xì)胞儀顯示體外分離培養(yǎng)的原代9天EPCs表面抗原表達(dá)分別是CD34陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率79.42％，CD133陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率4.14％，VEGFR-2陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率55.7％。應(yīng)用阿

4、托伐他汀治療能顯著增加殘腎模型大鼠EPCs增值、粘附及能力(P＜0.05)，并增加外周血EPCs數(shù)量(P＜0.05)，顯著增加腎組織CD34+細(xì)胞的數(shù)目以及腎小球毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞密度(P＜0.05)，上調(diào)腎組織VEGF、eNOS mRNA的表達(dá)(P＜0.05)，下調(diào)腎組織ET1、TGF-β、COLⅣ mRNA的表達(dá)(P＜0.05)，從而改善腎小球毛細(xì)血管內(nèi)皮功能，減輕炎癥細(xì)胞侵潤(rùn)、系膜增生、系膜基質(zhì)沉積，減輕腎小球硬化腎間質(zhì)纖維化(P＜