壓電石英晶體凝血傳感器檢測(cè)血漿纖維蛋白原和凝血因子Ⅷ的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、本文在構(gòu)建壓電石英晶體凝血傳感器檢測(cè)系統(tǒng)基礎(chǔ)上，對(duì)傳感器檢測(cè)條件進(jìn)行優(yōu)化，用該傳感器建立了血漿纖維蛋白原(FIB)和凝血因子Ⅷ(FⅧ)的檢測(cè)方法，并進(jìn)行了凝血酶原時(shí)間(PT)、活化部分凝血酶時(shí)間(APTT)、凝血酶時(shí)間(TT)、纖維蛋白原(FIB)、凝血因子Ⅷ(FⅧ)的臨床對(duì)比研究，以探索實(shí)際應(yīng)用的可行性。 方法1.利用精細(xì)微加工法制作石英晶體，其表面鍍銀膜，在此基礎(chǔ)上用帶有小孔的有機(jī)玻璃小板制備粘膠式傳感器微陣列，自行研制自激

2、式振蕩電路、PESAV2.0頻率記錄分析軟件，并將它們與計(jì)算機(jī)聯(lián)用以構(gòu)建壓電石英晶體凝血傳感器陣列檢測(cè)系統(tǒng)。 2.構(gòu)建血漿FIB和FⅧ凝血微陣列檢測(cè)體系：確定檢測(cè)的溫度、濕度、時(shí)間等條件，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，觀測(cè)檢測(cè)的靈敏度，線性范圍，進(jìn)行臨床標(biāo)本的檢測(cè)并與STAGO全血自動(dòng)凝血儀對(duì)比，探討檢測(cè)臨床標(biāo)本的可行性。 3.壓電石英晶體凝血傳感器診斷陣列的臨床研究，進(jìn)行凝血酶時(shí)間(TT)、凝血酶原時(shí)間(PT)、活化部分凝血酶時(shí)間(A

3、PTT)、纖維蛋白原(FIB)、凝血因子Ⅷ(FⅧ)的臨床標(biāo)本檢測(cè)工作，檢測(cè)40例臨床標(biāo)本，并與STAGO全自動(dòng)凝血分析儀進(jìn)行對(duì)照，為壓電石英晶體凝血分析儀的臨床推廣和應(yīng)用打下基礎(chǔ)。 結(jié)果1.1石英晶體傳感器：AT切型，電極被覆銀膜，基本頻率10MHz，晶體直徑8.5mm，銀膜電極直徑4.0mm。液相起振能力強(qiáng)，頻率穩(wěn)定，靈敏度高，適合用作凝集反應(yīng)的檢測(cè)。 1.2自行研制的自激式振蕩電路有非常強(qiáng)的振蕩能力，在液相中起振非常

4、容易，其頻率穩(wěn)定度可達(dá)實(shí)用要求。 1.3自行開發(fā)的PESAV2.0頻率記錄分析軟件具有自行設(shè)置各初始參數(shù)，實(shí)時(shí)記錄頻率變化、自動(dòng)繪制頻率變化趨勢(shì)圖及分析結(jié)果等多項(xiàng)功能，采集、分析后的數(shù)據(jù)自動(dòng)輸入到計(jì)算機(jī)。 1.4晶體表面用聚丙乙烯溶液涂層，減少了晶振在液相中的頻率波動(dòng)和測(cè)量誤差，增加了檢測(cè)過(guò)程中頻率的穩(wěn)定性(氣相頻率±1MHz、液相頻率±2MHz)，增加了傳感器響應(yīng)的靈敏度。 1.5加樣槽的設(shè)計(jì)減少了反應(yīng)過(guò)程中加

5、樣沖擊對(duì)頻率造成的影響。 1.6采用粘膠式的方法制備檢測(cè)池，制備簡(jiǎn)單，實(shí)現(xiàn)了各檢測(cè)指標(biāo)既能單一檢測(cè)，又能同時(shí)進(jìn)行多項(xiàng)檢測(cè)的目的。 2.構(gòu)建的壓電石英晶體凝血傳感器能在溫度34±2℃、相對(duì)濕度48±2％條件對(duì)血漿FIB和FⅧ快速完成檢測(cè)。檢測(cè)的靈敏度、線性范圍與臨床上的檢測(cè)方法相比較回歸分析吻合性好，提示所構(gòu)建的壓電石英晶體凝血傳感器可用于臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。 3.在溫度34±2℃、相對(duì)濕度48±2％條件下對(duì)臨床標(biāo)本進(jìn)

6、行凝血酶原時(shí)間(PT)、活化部分凝血酶時(shí)間(APTT)、凝血酶時(shí)間(TT)、纖維蛋白原(FIB)、凝血因子Ⅷ(FⅧ)與STAGO凝血儀的檢測(cè)結(jié)果相符，相關(guān)系數(shù)分別為：0.935、0.931、0.936、0.947、0.946。 結(jié)論1.自激式振蕩電路對(duì)壓電石英晶體傳感器陣列的液相振蕩進(jìn)行了特別的優(yōu)化，使傳感器陣列能夠在液相中更穩(wěn)定地工作。 2.“PESAV2.0”應(yīng)用軟件可實(shí)時(shí)記錄與分析石英晶體諧振頻率的新型實(shí)用軟件。

7、 3.晶體表面用聚丙乙烯溶液涂層，減少了晶振在液相中的頻率波動(dòng)和測(cè)量誤差，增加了檢測(cè)過(guò)程中頻率的穩(wěn)定性(氣相頻率±1Hz、液相頻率±2Hz)，增加了傳感器響應(yīng)的靈敏度。解決了銀膜在檢測(cè)過(guò)程中快速氧化對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響及傳感器制備數(shù)量受限的問(wèn)題。 4.粘膠式傳感器制備簡(jiǎn)單，成本低廉，可一次檢測(cè)一個(gè)或多個(gè)項(xiàng)目。 5.加樣槽的設(shè)計(jì)減少了檢測(cè)過(guò)程中加樣沖擊對(duì)檢測(cè)頻率的影響。 6.壓電石英晶體凝血傳感器是繼光比色法、磁

8、珠法之后的一種靈敏、快速、準(zhǔn)確的新方法。其起始終點(diǎn)易判斷，能實(shí)時(shí)在線觀測(cè)每一反應(yīng)過(guò)程的新方法，而且此方法成本低廉，操作簡(jiǎn)單。 7.溫度、濕度對(duì)凝集反應(yīng)的過(guò)程有較大的影響，始終是檢測(cè)過(guò)程中關(guān)鍵的問(wèn)題。 8.應(yīng)用壓電石英晶體凝血傳感器檢測(cè)FIB濃度和FⅧ活性與STAGO凝血分析儀相比較檢測(cè)結(jié)果相符。 9.通過(guò)對(duì)臨床標(biāo)本的檢測(cè)，我們認(rèn)為壓電石英晶體凝血傳感器是檢測(cè)凝血指標(biāo)結(jié)果準(zhǔn)確、操作簡(jiǎn)單、快速、成本低廉、靈敏度高、重