NF-κB及其調(diào)控產(chǎn)物在小鼠EAH中的表達(dá)及意義.pdf

1、自身免疫性肝炎是一種病因未明的慢性進(jìn)行性炎癥性肝病，女性多見(jiàn)，免疫抑制劑通常有效。組織學(xué)表現(xiàn)為匯管區(qū)大量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，血清學(xué)表現(xiàn)為非肝特異性循環(huán)自身抗體的出現(xiàn)，轉(zhuǎn)氨酶升高，γ球蛋白或IgG升高。但其發(fā)病機(jī)制目前尚不十分清楚。 近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，通過(guò)免疫手段，用C57BL/6近交系小鼠肝臟提取物與弗氏完全佐劑混合作為抗原，對(duì)同種系小鼠腹腔注射建立的實(shí)驗(yàn)性自身免疫性肝炎(EAH)動(dòng)物模型，其病變特點(diǎn)與人類慢性肝炎非常接近，認(rèn)為是研究人

2、類病毒性肝炎和自身免疫性肝炎比較理想的模型。 核因子-κB(NF-κB)作為重要的細(xì)胞因子，在許多肝臟疾病的肝損傷過(guò)程中起著重要的作用。研究表明，NF-κB能調(diào)控細(xì)胞間粘附分子-1(ICAM-1)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)等基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá)。 NF-κB是否參與AIH的免疫性肝損傷過(guò)程，目前尚無(wú)相關(guān)報(bào)道，但根據(jù)其調(diào)控產(chǎn)物在AIH中的作用，推測(cè)NF-κB可能在AIH發(fā)病中起重大作用。

3、 目的：本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立EAH模型，探討NF-κB及其調(diào)控產(chǎn)物ICAM-1、TNF-α、IL-6在EAH中的表達(dá)和在肝損傷中的可能作用。 方法：40只雄性4周齡C57BL/6小鼠，造模時(shí)體重為20.32±0.86g，采用同種系小鼠肝臟提取物即肝抗原S-100與等體積弗氏完全佐劑混勻后，予小鼠腹腔注射，建立實(shí)驗(yàn)性自身免疫性肝炎模型。小鼠隨機(jī)分為兩組，即對(duì)照組和模型組。對(duì)照組小鼠不做任何處理，普通飼養(yǎng)，模型組于每周腹腔注射1次S-10

4、0與等體積弗氏完全佐劑混勻物1ml，共注射4次。于第28天處死所有動(dòng)物，分離血清-20℃保存以各測(cè)丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、白蛋白(A)、球蛋白(G)；取部分肝左葉予10％甲醛固定4h以上，脫水、石蠟包埋，用于HE染色和NF-κB、ICAM-1、TNF-α、IL-6免疫組織化學(xué)染色。HE結(jié)果用光學(xué)顯微鏡觀察，免疫組織化學(xué)染色結(jié)果以陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)占總細(xì)胞數(shù)的百分比表示。 所有數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((x)

5、±s)表示，并應(yīng)用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，組間比較用Student'st檢驗(yàn)，P＜0.05即認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論：(1)通過(guò)S-100與弗氏完全佐劑給予小鼠腹腔注射后，成功建立了實(shí)驗(yàn)性自身免疫性肝炎動(dòng)物模型。(2)NF-κB及其調(diào)控的ICAM-1、TNF-α、IL-6在EAH模型中均有表達(dá)，提示NF-κB及其調(diào)控產(chǎn)物可能在EAH肝損傷的發(fā)病過(guò)程中起到一定的作用。(3)NF-κB通過(guò)調(diào)控ICAM-1、TNF-α、IL