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文檔簡介
1、目的:檢測子宮平滑肌瘤細胞和周圍正常子宮肌層細胞中垂體腫瘤轉化基因-1(PTTG-1)和堿性成纖維細胞生長因子(bmGF)的表達水平,并分析兩者的關系,探討其在子宮肌瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用,從而為臨床非手術治療子宮肌瘤提供新思路。 方法:體外原代培養(yǎng)人子宮平滑肌瘤細胞和周圍正常子宮肌層細胞并傳代,免疫細胞化學SABC法進行細胞學鑒定。采用逆轉錄.聚合酶鏈反應(RT-PCR)方法檢測培養(yǎng)細胞中PTTG-1mRNA和bFGFmRNA的
2、表達,并分析bFGF干預對體外培養(yǎng)子宮平滑肌瘤細胞中的PTTG-1mRNA表達的量效關系和時效關系。 結果: (1)成功培養(yǎng)了人子宮平滑肌瘤細胞和周圍正常子宮肌層細胞,并且經免疫細胞化學鑒定證實。 (2)子宮肌瘤細胞中bFGFmRNA的表達水平(1.220±0.032)顯著高于周圍正常子宮肌層細胞(1.125±0.048),且差異有顯著性(P<0.05)。 (3)子宮肌瘤細胞中PTTG-1mRNA的表達水
3、平(1.093±0.036)顯著高于周圍正常子宮肌層細胞(0.497±0.093),差異有顯著性(P<0.001);而在肌瘤或肌層細胞中PTTG-1mRNA的表達水平分別在增殖期(1.087±0.025,0.557±0.070)和分泌期(1.100±0.050,0.4374-0.078)比較均無顯著差異(P>0.05)。 (4)不同濃度bFGF對子宮肌瘤細胞干預,提示bFGF不同濃度干預的子宮肌瘤細胞PTTG-1 mRNA表達有
4、差別,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01);不同濃度兩兩比較發(fā)現,隨著濃度的增高,其表達逐漸增加。未加藥組(1.113±0.015)與加藥組比較,差異均有顯著性(P<0.05);加5ng/mL(1.180±0.020)與加10ng/mL、50ng/mL濃度組比較差異亦均有顯著性(P<0.05);同樣加10ng/mL(1.240±0.043)與加50ng/mL(1.303±0.025)比較差異顯著,有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 (5
5、)不同時間bFGF對子宮肌瘤細胞干預,提示不同作用時間bFGF干預下,子宮肌瘤細胞中PTTG-1mRNA的表達不同,同樣不同濃度作用下其表達亦不同,兩者差異顯著,均具有統(tǒng)計學意義(P<0.01),且時間和濃度之間存在交互作用(P<0.01)。進一步進行單因素方差分析提示:bFGF未干預組的子宮肌瘤細胞,在各個不同時間點,PTTG-1mRNA表達差別無統(tǒng)計學意義(P<0.05)。而bFGF干預組的子宮肌瘤細胞,隨著時間的增加,PTTG-1
6、mRNA表達升高,組間比較差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。不同時間點兩兩比較發(fā)現:bFGF干預后48h、60h明顯高于36h和24h,差異均具有統(tǒng)計學意義(P<0.05),而干預后36h(1.127±0.021)與24h(1.120±0.020)比較無顯著性差異(P>0.05),48h(1.173±0.021)與60h(1.213±0.015)比較有顯著差異(P<0.05);從而提示:bFGF干預后的子宮肌瘤細胞,隨著時間的增加,PT
7、TG-1mRNA表達逐步升高,且分別在干預后48h、60h差別有顯著性。 結論: (1)bFGF作為一種重要的生長因子,其在子宮肌瘤細胞中的高表達,提示可能通過促進子宮肌瘤的血管形成和刺激子宮肌瘤細胞的增殖等多種環(huán)節(jié)促進子宮肌瘤的發(fā)展。 (2)PTTG-1在子宮肌瘤細胞中的表達明顯高于正常子宮肌層細胞,提示:PTTG-1基因的異常表達可能與子宮肌瘤的發(fā)生有關。在月經周期的增殖期肌瘤或鄰近肌層細胞中PTTG-1mR
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