重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子對(duì)HacaT細(xì)胞增殖的影響.pdf

1、目的:掌握HaCaT細(xì)胞培養(yǎng)的技術(shù)，了解細(xì)胞的生長特性；研究重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子(rh-bFGF)在不同濃度下對(duì)HaCaT細(xì)胞的增殖影響，以及rh-bFGF對(duì)HaCaT細(xì)胞有無異常分化的作用，并以此為臨床準(zhǔn)確定量應(yīng)用rh-bFGF修復(fù)創(chuàng)面愈合提供理論依據(jù)。 方法:利用HaCaT細(xì)胞體外培養(yǎng)，用不同濃度的rh-bFGF干預(yù)細(xì)胞，四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT)檢測細(xì)胞的活性，選擇最適濃度rh-bFGF干預(yù)的HaCaT細(xì)胞，用

2、流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞的DNA倍體情況。 結(jié)果:①HaCaT細(xì)胞生長過程的觀察：HaCaT細(xì)胞傳代后24h基本貼壁，未貼壁的細(xì)胞在換液過程中被清除，約4-5天長滿瓶底的80％，繼續(xù)傳代。該細(xì)胞分布較均勻，呈長條形或梭形。②不同濃度rh-bFGF對(duì)HaCaT細(xì)胞增殖的影響：rh-bFGF的濃度為0-100ng/ml時(shí)，不同濃度各組相比，P<0.05，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，吸光度值分別為0.137±0.012，0.216±0.022，0.31

3、8±0.019，0.362±0.011，0.452±0.017，0.510±0.012，提示此濃度下對(duì)HaCaT。細(xì)胞有增殖作用，在100ng/ml下增殖最強(qiáng)；在500ng/ml時(shí)，與Ong/ml組相比，P>0.05,無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，吸光度值為0.140±0.057，提示無明顯增殖作用。③培養(yǎng)48h時(shí)流式細(xì)胞儀對(duì)rh-bFGF最適濃度下細(xì)胞倍體含量的測定：在100ng/ml下無細(xì)胞倍體異常的情況。 結(jié)論:rh-bFGF的濃度為1-