堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)去卵巢大鼠骨組織的影響.pdf

1、目的：絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥（postmenopausal osteoporosis，PMO）及骨質(zhì)疏松性骨折是威脅老年婦女健康的主要問(wèn)題。給予這類患者骨吸收抑制劑，比如雌激素和二磷酸鹽類藥物，只能適當(dāng)?shù)脑黾庸橇?，不能使骨量恢?fù)到絕經(jīng)前的水平，因?yàn)樗鼈冊(cè)谝种乒俏盏耐瑫r(shí)也抑制骨形成。本研究通過(guò)觀察堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）對(duì)去卵巢2個(gè)月后大鼠骨組織的影響，探討堿性成纖維細(xì)胞

2、生長(zhǎng)因子對(duì)絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松的作用及可能的作用機(jī)制。
　　 方法：取3月齡的雌性Sprague-Dawley大鼠30只，在戊巴比妥鈉（20g/kg）麻醉?xiàng)l件下，其中20只打開腹腔去除雙側(cè)卵巢，逐層縫合，其余10只給予以單純打開腹腔不切除卵巢，術(shù)后給予抗生素預(yù)防感染。將大鼠分為A組（假手術(shù)組，Sham組）、B組（卵巢切除組，OVX組）、C組（卵巢切除加bFGF組，OVX+bFGF組）。術(shù)后第10周開始用藥，OVX+bFGF組給予bFG

3、F1mg/kg皮下注射，每周5次。給藥劑量每周按體重校正一次。用藥3周后，麻醉大鼠后采用雙能X線測(cè)定大鼠全身骨密度值，然后斷頭處死各組大鼠，取右脛骨上段做病理切片，通過(guò)HE染色對(duì)骨組織形態(tài)學(xué)變化進(jìn)行觀察比較；采用免疫組化過(guò)氧化物酶標(biāo)記鏈霉卵白素法（SP法）分別檢測(cè)IGF-1、TGF-β1蛋白在各組大鼠骨組織中的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1.各組大鼠全身骨密度比較與Sham組相比：OVX組全身骨密度下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

4、（P<0.01），提示骨質(zhì)疏松模型建立成功；與OVX組相比：OVX+bFGF組全身骨密度顯著性升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；OVX+bFGF組與Sham組相比較全身骨密度無(wú)明顯差異（P>0.05）。
　　 2.各組大鼠骨組織學(xué)特征比較（1）Sham組：骨小梁豐富，形態(tài)結(jié)構(gòu)完整，排列密集、有規(guī)則，小梁排列以縱向?yàn)橹鳎B接呈網(wǎng)狀，骨小梁間距小，皮質(zhì)骨致密。（2）OVX組：骨小梁總量較Sham組明顯減少，排列稀疏，網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)缺

5、如，出現(xiàn)大量骨小梁盲端，小梁壁的厚度不一致，骨小梁間距增寬，皮質(zhì)骨變薄。（3）OVX+bFGF組：與OVX組比較，骨小梁數(shù)目增多，排列較為緊密，骨小梁連接增多，與Sham組相似。
　　 3.骨組織中IGF-I和TGF-β1的定位及表達(dá)（1）骨組織中IGF-I蛋白陽(yáng)性表達(dá)為胞漿棕黃色染色，IGF-I陽(yáng)性表達(dá)主要位于骨小梁周圍的成骨細(xì)胞及骨基質(zhì)中。OVX組陽(yáng)性染色的成骨細(xì)胞數(shù)量明顯減少，OVX+bFGF組陽(yáng)性染色的成骨細(xì)胞數(shù)量較OV

6、X組顯著增多。圖像分析表明：OVX組骨組織IGF-I陽(yáng)性染色平均光密度值較OVX+bFGF組顯著減弱，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。OVX+bFGF組與Sham組比較，IGF-I陽(yáng)性染色平均光密度值無(wú)明顯差異（P>0.05）。（2）骨組織中TGF-β1蛋白陽(yáng)性表達(dá)為胞漿棕黃色染色。TGF-β1陽(yáng)性表達(dá)主要位于骨小梁周圍的成骨細(xì)胞、骨細(xì)胞以及骨基質(zhì)。不同組別骨組織中表達(dá)不同。Sham組骨組織中TGF-β1有陽(yáng)性染色成骨細(xì)胞、骨細(xì)胞以及

7、骨基質(zhì)呈棕黃色。OVX組骨組織中，陽(yáng)性成骨細(xì)胞、骨細(xì)胞數(shù)量明顯減少。OVX+bFGF組陽(yáng)性成骨細(xì)胞、骨細(xì)胞數(shù)量較OVX組增多。圖像分析表明：OVX組骨組織TGF-β1陽(yáng)性染色平均光密度值較OVX+bFGF組顯著減弱，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。OVX+bFGF組與Sham組比較，TGF-β1陽(yáng)性染色平均光密度值無(wú)明顯差異（P>0.05）。
　　 結(jié)論：堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子是一種廣譜的有絲分裂原，可以增加去卵巢大鼠的骨密度