E-選擇素和細胞間粘附分子-1反義寡核苷酸對人臍靜脈內(nèi)皮細胞與單核細胞粘附功能的影響.pdf

1、目的： 探討E-選擇素(E-selectin)和細胞間粘附分子-1(ICAM-1)反義寡核苷酸(asODN)及其與辛伐他汀(simvastatin)聯(lián)合應(yīng)用對人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVEC)ICAM-1和E-selectin表達的抑制和對外周血單個核細胞粘附的影響。 方法： 原代培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVEC)，并傳代；應(yīng)用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將人工合成E-selectin asODN和ICAM-1 asODN分別導入H

2、UVECs；實驗共分8組，分別為空白對照 (basal)組、TNF-α誘導組、liposome對照組、liposome-control asODN組、裸asODN(nude asODN)組、脂質(zhì)體asODN(lipo-asODN)組、simvastatin處理組、lipo-asODN與simvastatin聯(lián)合組，除空白組外，其余7組均以TNF-α誘導內(nèi)皮損傷；以流式細胞技術(shù)測定HUVECs細胞膜E-selectin和ICAM-1蛋白的

3、表達；以RT-PCR半定量技術(shù)測定HUVECsE-selectin mRNA和ICAM-1 mRNA的表達；以細胞粘附試驗測定HUVECs與單個核細胞的粘附率；應(yīng)用辛伐他汀預(yù)先處理HUVECs，再用E-selectin lipo-asODN和ICAM-l lipo-asODN轉(zhuǎn)染HUVECs，觀察E-selectin asODN和ICAM-1 asODN與辛伐他汀聯(lián)合應(yīng)用對HUVECs E-selectin和ICAM-1的表達以及對HU

4、VECs與外周血單個核細胞粘附抑制的影響。 結(jié)果： (1)與TNF-α誘導組相比，E-selectin asODN和ICAM-1 asODN以及E-selectin 1ipo-asODN和ICAM-1 lipo-asODN均明顯降低了HUVECs相應(yīng)的E-selectin和ICAM-1蛋白及mRNA的表達(P<0.01)； (2)E-selectin asODN和ICAM-1 lipo-asODN與simvast

5、atin聯(lián)合應(yīng)用可降低對HUVECs相應(yīng)的E-selectin和ICAM-1的蛋白及mRNA表達； (3)lipo-asODN與simvastatin聯(lián)合組與lipo-asODN組比較，E-selectin表達水平顯著下降(P<0.01)，而ICAM-1的表達水平下降無顯著意義(P>0.05)，表明E-selectin lipo-asODN與simvastatin聯(lián)合作用有更好的抑制效果。 (4)與TNF-α刺激組相比，

6、lipo-asODN組及l(fā)ipo-asODN與simvastatin聯(lián)合組HUVECs與單個核細胞粘附率均顯著下降(P<0.01)，尤其以HUVECs與CD3+T淋巴細胞的粘附率下降最為明顯，但lipo-asODN與simvastatin聯(lián)合組與lipo-asODN組比較，未見明顯變化(P>0.05)。 結(jié)論： E-selectin asODN和ICAM-1 asODN可抑制HUVECs相應(yīng)的蛋白及mRNA的表達，并可抑