基質(zhì)金屬蛋白酶3對(duì)急性眼高壓后大鼠視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞存活的影響.pdf

1、目的:(1)研究正常大鼠視網(wǎng)膜中基質(zhì)金屬蛋白酶3(Matrixmetalloproteinase3，MMP3)的定位以及在急性眼高壓后大鼠視網(wǎng)膜中的表達(dá)情況，(2)檢測(cè)MMP3對(duì)急性眼高壓后視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞存活的影響。
　　方法:所有的SD大鼠被隨機(jī)分成正常對(duì)照組、假手術(shù)組、急性眼高壓組、急性眼高壓+藥物組和急性眼高壓+溶劑組。急性眼高壓組的大鼠前房通過(guò)注射無(wú)菌生理鹽水升高眼內(nèi)壓至110mmHg并維持60min后緩慢降壓;急性眼高壓+

2、藥物組和急性眼高壓+溶劑組大鼠在前房注射生理鹽水前30min腹腔注射N(xiāo)NGH(N-Isobutyl-N-(4-methoxyphenylsulfonyl)glycyl hydroxamic acid，一種MMP3高靈敏度抑制劑）和3％DMSO，之后以1次/8h給藥1d。;對(duì)照組大鼠不做任何處理;假手術(shù)組大鼠刺穿角膜后壓力維持在20mmHg，不加壓。動(dòng)物分別存活6h、1d、3d、7d后處死。用western blotting、免疫組織化學(xué)

3、、免疫熒光和免疫熒光雙標(biāo)來(lái)檢測(cè)MMP3在正常成年大鼠視網(wǎng)膜中的分布和它對(duì)急性眼高壓后視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞存活的影響。
　　結(jié)果:
　　1.MMP3在正常成年大鼠視網(wǎng)膜中其陽(yáng)性產(chǎn)物主要分布在神經(jīng)纖維層、節(jié)細(xì)胞層、內(nèi)網(wǎng)層、內(nèi)核層和外網(wǎng)層的神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中。MMP3陽(yáng)性產(chǎn)物在節(jié)細(xì)胞層與NeuN陽(yáng)性產(chǎn)物明顯雙標(biāo);在內(nèi)核層邊緣部與部分Calbindin陽(yáng)性產(chǎn)物和Parvalbumin陽(yáng)性產(chǎn)物雙標(biāo);在內(nèi)網(wǎng)層和內(nèi)核層與PKC-α陽(yáng)性產(chǎn)物雙標(biāo)

4、;MMP3陽(yáng)性產(chǎn)物在內(nèi)外網(wǎng)層與Synaptophysin陽(yáng)性產(chǎn)物明顯雙標(biāo);而在外核層MMP3的陽(yáng)性產(chǎn)物與Rhodopsin陽(yáng)性產(chǎn)物沒(méi)有明顯雙標(biāo);在節(jié)細(xì)胞層和神經(jīng)纖維層中，MMP3與GFAP陽(yáng)性產(chǎn)物明顯雙標(biāo)，與部分GS陽(yáng)性產(chǎn)物雙標(biāo);在內(nèi)網(wǎng)層中，與部分CD11b陽(yáng)性產(chǎn)物雙標(biāo)。
　　2.急性眼高壓后MMP3的表達(dá)在早期呈現(xiàn)升高的趨勢(shì)，在3d時(shí)達(dá)到頂峰，然后下降。
　　3.NNGH干預(yù)后，大鼠視網(wǎng)膜中MMP3的表達(dá)在急性高眼壓1d和