胡黃蓮苷Ⅱ?qū)Υ笫竽X缺血損傷后基質(zhì)金屬蛋白酶-9表達的影響.pdf

1、目的:探討胡黃連苷Ⅱ?qū)Υ笫竽X缺血損傷后基質(zhì)金屬蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase9，MMP-9)表達的影響，并優(yōu)化最佳治療劑量和時間窗。
　　方法:將174只Wistar大鼠隨機分為腦缺血組（模型組）(n=5×3)、正常對照組(n=5×3)和胡黃連苷Ⅱ治療組(n=16×3×3)，應用雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎法（bilateral common carotid artery occlusion，BCCAO）建立大鼠前

2、腦缺血動物模型，按正交試驗設計將治療組大鼠分組，并經(jīng)腹腔注射相應劑量的胡黃連苷Ⅱ干預治療。用蘇木精-伊紅(haematoxylin eosin，HE)染色觀察各組大鼠腦組織神經(jīng)細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu);透射電子顯微鏡(transmission electron microscopy，TEM)觀察各組大鼠腦組織超微結(jié)構(gòu);免疫組織化學(immunohistochemistry，IHC)染色和蛋白免疫印跡法(Western Blotting，WB)檢測

3、各組大鼠腦組織MMP-9蛋白表達水平;逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(reverse transcription polymerase chainreaction，RT-PCR)檢測各組大鼠腦組織MMP-9 mRNA轉(zhuǎn)錄水平。
　　結(jié)果:與對照組相比，模型組大鼠腦組織中MMP-9表達水平明顯增高，腦組織損傷程度嚴重。經(jīng)胡黃連苷Ⅱ干預后，治療組大鼠腦組織MMP-9表達水平較模型組明顯降低，腦組織結(jié)構(gòu)明顯改善，損傷減輕。胡黃連苷Ⅱ治療腦缺血損傷

4、的最佳療效:依據(jù)HE染色結(jié)果分析為腦缺血2.0h腹腔注射10mg/kg;依據(jù)IHC結(jié)果染色分析為腦缺血2.0h腹腔注射10mg/kg;依據(jù)WB結(jié)果分析為腦缺血1.5h腹腔注射10mg/kg;依據(jù)RT-PCR結(jié)果分析為腦缺血1.5h腹腔注射20mg/kg。
　　結(jié)論:胡黃連苷Ⅱ可以降低大鼠腦缺血損傷后MMP-9的表達，對腦組織起到顯著的保護作用。按治療時間窗最大化和用藥劑量最小化的原則，其最佳治療時間窗和劑量為腦缺血1.5-2.0h