三個家馬品種泌乳相關基因多態(tài)性及其與伊犁馬產(chǎn)奶量的關聯(lián)研究.pdf

1、馬奶含有豐富的維生素和礦物質，營養(yǎng)價值極高，但其產(chǎn)量遠低于牛奶。隨著人民生活水平的提高，馬奶的需求量增加，加強馬泌乳遺傳基礎研究，開發(fā)相關的分子標記，培育乳用馬品種勢在必行。本研究選擇了9個家畜泌乳性能候選基因:催乳素(PRL)及催乳素受體基因(PRLR)、垂體特異性轉錄因子1(POU1F1)、生長激素1（GH1）及生長激素受體基因(GHR)、乳鐵蛋白基因(LTF)、雌激素受體基因(ESR1、ESR2)和三磷酸腺苷結合轉運蛋白G超家族成

2、員2基因(ABCG2)，根據(jù)NCBI提供的基因序列設計擴增CDS區(qū)序列，以3個中國家馬品種（伊犁馬、關中馬和蒙古馬）共337匹馬為研究對象，測序檢測鑒定候選基因CDS區(qū)的單核苷酸多態(tài)位點，采用PCR-RFLP技術對其進行分型，并將伊犁馬上發(fā)現(xiàn)SNP位點與伊犁馬日均產(chǎn)奶量進行單因素方差分析，獲得如下研究結果：
　　1.在3個中國家馬品種9個泌乳相關基因中檢測到10個SNPs(PRL c.210C＞T，PRL g.9115T＞G,PR

3、L g.9119C＞A,PRL g.11090A＞G,PRLR g.145227T＞G,POU1F1g.2758T＞C,GH1c.22A＞C,GH1g.1584C＞G,GHR g.-562C＞T,LTFc.172G＞A),均為首次發(fā)現(xiàn)。其中PRLR g.145227T＞G，GHR g.-562C＞T，LTFc.172G＞A3個位點僅發(fā)現(xiàn)于伊犁馬上，PRL g.9115T＞G，PRLg.11090A＞G，GH1c.22A＞C，GH1g.1

4、584C＞G4個位點僅發(fā)現(xiàn)于關中馬上，PRL g.9119C＞A位點為關中馬、蒙古馬共有，PRL c.210C＞T，POU1F1g.2758T＞C位點在三個品種上均有發(fā)現(xiàn)。全部10個SNP多態(tài)位點中，有3個位點發(fā)生在基因的CDS區(qū)域，引起錯義突變;1個位點發(fā)生在基因的啟動子區(qū)域，其余6個位點均發(fā)生在內含子上。
　　2.使用PCR-RFLP方法對伊犁馬上檢測到的SNP多態(tài)進行分型統(tǒng)計，并與其120天日均產(chǎn)奶量進行關聯(lián)分析。檢測到伊犁

5、馬上存在的5個不同基因的SNP位點中，PRLc.210C＞T和LTFc.172G＞A是發(fā)生在CDS區(qū)上的錯義突變，PRL c.210C＞T突變導致PRL基因編碼蛋白第70位苯丙氨酸突變?yōu)榱涟彼?，LTFc.172G＞A突變致LTF編碼蛋白第57位精氨酸突變?yōu)橘嚢彼?GHR g.-562C＞T發(fā)生在GHR基因啟動子區(qū)域，其余位點均位于內含子上。與日均產(chǎn)奶量的關聯(lián)分析結果顯示，5個不同基因的SNP位點中，除PRL c.210C＞T外，各位點不

6、同基因型的日均產(chǎn)奶量差異不顯著。PRL c.210C＞T位點不同基因型的日均產(chǎn)奶量差異顯著，其中CC基因型個體日均產(chǎn)奶量顯著高于CT基因型個體，CT基因型個體日均產(chǎn)奶量與TT基因型個體差異不顯著，推測C等位基因可能對伊犁馬產(chǎn)奶量性狀有正遺傳效應。
　　3.使用雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)，檢測馬PRL、PRLR基因啟動子活性區(qū)域。檢測結果顯示，馬PRL基因上游-418～-1050bp區(qū)間為該基因的主要活性區(qū)域，其中-418～-738bp