骨橋蛋白與表皮生長因子受體在食管鱗癌中的表達及臨床意義.pdf

1、背景與目的 食管癌是我國最常見的惡性腫瘤之一，死亡率在我國惡性腫瘤中位居第四，其中在河南的發(fā)病率和死亡率最高，嚴重危害了我國人民的身體健康，因此探討食管癌的發(fā)生發(fā)展機制已成為研究的熱點之一。 1979年，Senger首先報道了惡性轉(zhuǎn)化的上皮細胞可分泌一種磷酸蛋白，即骨橋蛋白(osteopontin，OPN)。OPN是富含天冬氨酸和唾液酸殘基的可分泌糖蛋白，包含有多種功能域，其中含有特異的Arg-Gly-Asp序列(RGD

2、)，通過這個序列與其生長所需的微環(huán)境——細胞外基質(zhì)(extracellular marx，ECM)相結(jié)合。通過與整合素和CD44受體的結(jié)合，OPN可介導(dǎo)細胞與基質(zhì)的相互作用及細胞內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，從而在腫瘤的進展中發(fā)揮重要的作用。近年來，越來越多的證據(jù)顯示，OPN在許多腫瘤細胞中表達上調(diào)，與腫瘤血管生成、侵襲轉(zhuǎn)移、抑制凋亡等方面關(guān)系密切。 隨著表皮生長因子(epidennal growth factor，EGF)的發(fā)現(xiàn)(1962年)

3、，人表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)完整cDNA的獲得(1984年)，以及對細胞信號傳導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)深入的研究(90年代)，人們已認識到作為受體酪氨酸激酶超家族成員之一的EGFR及其家族成員，在EGF等相應(yīng)配體的刺激下，通過受體自身磷酸化參與細胞生長信號傳遞，對上皮源性細胞的增殖、存活和分化起著重要的調(diào)節(jié)作用。近年來EGFR與癌基因相關(guān)性研究顯示，細胞Src(c-Src)癌基因和EG

4、FR不僅具有高度的同源性，并在許多人類腫瘤均過度表達，表明EGFR及其家族成員具有癌基因潛能，與細胞的轉(zhuǎn)化有密切關(guān)系。腫瘤細胞主要通過自分泌和旁分泌TGF-α、EGF；它們作用于EGFR，使其獲得生長優(yōu)勢，提示該信號系統(tǒng)在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中占有重要地位。 OPN和EGFR在食管鱗癌的發(fā)生發(fā)展的關(guān)系及其相互作用的研究，目前國內(nèi)外報道鮮見。本研究用免疫組化的方法檢測OPN及EGFR在食管鱗狀細胞癌中的表達情況，探討其臨床意義，并分析二者在食

5、管鱗癌發(fā)生發(fā)展中的相互作用。 材料與方法 1．選取焦作市第二醫(yī)院外科1992年1月至2000年8月60例手術(shù)切除食管癌標(biāo)本(同一病例包括癌組織、5cm以外的癌旁正常組織)，HE切片病理證實為鱗癌。全部病例術(shù)后未行放療或化療，并進行6-18個月的隨訪。 2．應(yīng)用免疫組織化學(xué)S-P方法檢測60例食管鱗狀細胞癌組織及其相應(yīng)的癌旁正常組織中OPN及EGFR蛋白的表達情況。 3．統(tǒng)計工具用SPSS10.0及SAS統(tǒng)

6、計軟件包，統(tǒng)計方法采用x<'2>檢驗、Spearman相關(guān)分析、Kaplan-Meier及Log-rank test時序檢驗法，檢驗水準(zhǔn)為α=0.05。 結(jié)果 1．60例食管鱗癌標(biāo)本中，48例OPN染色陽性80.0％(48/60)；在60例癌旁正常組織標(biāo)本中未見OPN表達；結(jié)果顯示，OPN的陽性表達率在食管鱗癌及癌旁正常組織間的差異具統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。在食管鱗癌組織中，OPN主要存在于腫瘤細胞的細胞漿中。OPN

7、多彌散表達于癌巢中，在癌巢邊緣分布較少。 2．60例食管鱗癌標(biāo)本中，43例EGFR染色陽性71.7％(43/60)；60例癌旁組織中11例EGFR染色陽性18.3％(11/60)；結(jié)果顯示，EGFR的陽性表達率在食管鱗癌及癌旁正常組織間的差異具統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；在食管鱗癌組織中，EGFR的陽性顆粒主要位于腫瘤細胞的胞漿及部分細胞核內(nèi)，周圍基質(zhì)中未見陽性染色。 3．60例食管鱗癌標(biāo)本中，在高分化組OPN的陽性表達

8、率為65.5％(19/29)，低于中低分化組93.5％(29/31)，二者之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；有淋巴轉(zhuǎn)移組的OPN的陽性表達率為97.1％(34/35)，高于無淋巴轉(zhuǎn)移組56.0％(14/25)，二者之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；在TNM分期中Ⅰ、Ⅱ期組OPN的陽性表達率為67.7％(22/31)，低于Ⅲ、Ⅳ期組93.1％(26/29)，二者之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；浸潤深度T<,1>+T<,2>組

9、OPN的陽性表達率為73.5％(25/34)，低于T<,3>+T<,4>組88.5％(23/26)，二者之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。 4．60例食管鱗癌標(biāo)本中，在高分化組EGFR的陽性表達率為57.7％(15/26)，低于中低分化組82.4％(28/34)，二者之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；有淋巴轉(zhuǎn)移組的EGFR的陽性表達率為83.9％(26/31)，高于無淋巴轉(zhuǎn)移組58.6％(17/29)，二者之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(

10、P<0.05)；在TNM分期中Ⅰ、Ⅱ期組EGFR的陽性表達率為51.7％(15/29)，低于Ⅲ、Ⅳ期組90.3％(28/31)，二者之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；浸潤深度T<,1>+T<,2>組EGFR的陽性表達率為48.0％(12/25)，低于T<,3>+T<,4>組77.1％(27/35)，二者之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 5．對60例食管鱗癌患者進行6-18月的隨訪，刪除失去聯(lián)系3例，OPN蛋白表達陽性的

11、生存率為39.1％(18/46)，低于OPN蛋白表達陰性者72.7％(8/11)，并應(yīng)用Kaplan-Meier，Log-rank test時序檢驗法進行生存率的比較；結(jié)果顯示，差異有顯著性(P<0.05)。 6．對60例食管鱗癌患者進行6-18月的隨訪，刪除失去聯(lián)系3例，EGFR蛋白表達陽性的生存率為38.1％(16/42)，低于EGFR蛋白表達陰性者66.7％(10/15)，并應(yīng)用Kaplan-Meier、Log-rank

12、test時序檢驗法進行生存率的比較，結(jié)果顯示，差異有顯著性(P<0.05)。 7．對60例食管鱗癌標(biāo)本的OPN和EGFR表達的情況進行相關(guān)分析，共表達陽性組為38例，共表達陰性組為7例，OPN+、EGFR．表達組為10例，OPN-、EGFR+表達組為5例，二者呈正相關(guān)，Spearman相關(guān)系數(shù)r<,s>=0.333(P<0.05)。 結(jié)論 1．食管鱗癌組織中OPN呈現(xiàn)高表達，且其高表達與其分化程度及臨床分期、淋巴