均勻設(shè)計(jì)法制備硝酸益康唑納米粒滴眼液及應(yīng)用兔眼后的藥代動(dòng)力學(xué)研究.pdf

1、目的：均勻設(shè)計(jì)法優(yōu)化制備硝酸益康唑納米粒滴眼液并測(cè)定其粒徑、電荷、包封率及載藥量等基本性質(zhì)；高效液相法檢測(cè)硝酸益康唑納米粒滴眼液應(yīng)用兔眼后房水和角膜中的藥物濃度變化并分析其藥代動(dòng)力學(xué)特征。
　　 方法：?jiǎn)我蛩爻踹x制備條件，測(cè)定硝酸益康唑納米粒膠體液在自然光、避光、暴露于空氣中及60℃真空干燥5小時(shí)后的吸光度，分析其不同制備環(huán)境下納米粒的穩(wěn)定性；用純化水與PBS 緩沖液超濾稀釋納米粒，比較兩者對(duì)粒徑和電荷的影響，在納米粒中添加透明

2、質(zhì)酸鈉，聚乙烯醇，甘油，聚乙二醇，考察不同輔料添加下納米粒粒徑和電荷的變化，在pH值等于5.00和7.50之間考察納米粒粒徑和電荷，確定合適的酸堿度。在6個(gè)因素8個(gè)水平下制定均勻設(shè)計(jì)表，將測(cè)試結(jié)果綜合評(píng)分，總分與影響因素多元線性回歸，按回歸方程確定制備條件并描述均勻設(shè)計(jì)法優(yōu)選工藝下制備的硝酸益康唑納米粒滴眼液的外觀形態(tài)、電鏡、粒徑、電荷、包封率和載藥量。取健康無(wú)眼疾白色日本長(zhǎng)耳兔，隨機(jī)分成納米粒組和混懸液組，將用Vivaflow 50

3、超濾器濃縮的0.3％硝酸益康唑納米粒滴眼液作為試驗(yàn)藥物，0.3％硝酸益康唑混懸液作為對(duì)照藥物。在單劑量組中：試驗(yàn)藥物和對(duì)照藥物分別單次50μl 滴于兔眼，在突擊劑量組中：試驗(yàn)藥物和對(duì)照藥物每次50μl滴于兔眼，連續(xù)3次，每次間隔3min；均于最后一次給藥后在5min、15min、30min、45min、60min、90min、120min、180min、240min和300min 10個(gè)時(shí)間點(diǎn)抽取房水，剖取角膜組織。樣品處理后，采用反相

4、高效液相色譜法（RP-HPLC）測(cè)定樣品組織中益康唑的濃度，比較不同時(shí)間點(diǎn)兔眼房水和角膜的藥物濃度變化和經(jīng)時(shí)過(guò)程，分析其藥代動(dòng)力學(xué)特征,藥動(dòng)學(xué)參數(shù)處理采用3p97 藥動(dòng)學(xué)軟件。
　　 結(jié)果：均勻設(shè)計(jì)法優(yōu)選制備的ECZ-RS100-NP 滴眼液外觀呈現(xiàn)淡藍(lán)色乳光，電鏡照片顯示顆粒分散均勻一致，所得粒徑為50.47nm，電荷為+31.04mV。包封率為87.63％，載藥量為25.18％。
　　 在單劑量組中，房水中5min，

5、角膜中5min、15min、30min、45min、60min、90min和120min 時(shí)間點(diǎn)納米粒滴眼液組藥物濃度均高于對(duì)照組，且兩者比較具有顯著性差異（P<0.01）。在突擊劑量組，房水在5 min、15 min、30 min、45 min和120 min 時(shí)間點(diǎn)，角膜在時(shí)間點(diǎn)5 min,15 min,30 min 納米粒滴眼液組藥物濃度均高于對(duì)照組，且兩者比較具有顯著性差異（P<0.01 或P<0.05）。
　　 在房水

6、中，單劑量點(diǎn)眼后實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的達(dá)峰時(shí)間Tmax分別為5.0min和60min,實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的半衰期t1/2分別為47.38min和51.95min，在0-300min的藥物濃度－
　　 時(shí)間曲線下面積(AUC)分別為10.76(μg/ml)·min和86.47(μg/ml)·min。突擊劑量點(diǎn)眼后實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的達(dá)峰時(shí)間TmaX均為45.0min，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的半衰期t1/2分別為91.54min和150.35min，在0

7、-300min的藥物濃度－時(shí)間曲線下面積(AUC)分別為87.89(μg/ml)·min和241.74(μg/ml)·min。
　　 在角膜中，單劑量點(diǎn)眼后實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的達(dá)峰時(shí)間TmaX均為5min；達(dá)峰濃度分別為：28.18μg/g和22.09μg/g；半衰期t1/2分別為44.68min和30.55min，在0-300min的藥物濃度-時(shí)間曲線下面積(AUC)分別為555.48(μg/mg)·min和830.96(μg/m

8、g)·min，突擊劑量點(diǎn)眼后實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的達(dá)峰時(shí)間Tmax分別為30min和45min；達(dá)峰濃度分別為：
　　 31.73μg/g和28.44μg/g；半衰期t1/2分別為58.26min和57.79min，在0-300min的藥物濃度-時(shí)間曲線下面積(AUC)分別為2162.13(μg/mg)·min和2446.27(μg/mg)·min。
　　 結(jié)論：均勻設(shè)計(jì)法安排實(shí)驗(yàn)科學(xué)、合理、有效，所優(yōu)選制備的硝酸益康唑納米粒