SPARC、TGFβ1和Endoglin在肺癌中的表達及其與血管生成機制的研究.pdf

1、本課題采用組織芯片技術、免疫組織化學技術（immunohistochemistry, IHC）和原位雜交技術（In situ hybridization, ISH）檢測肺癌(lung cancer)組織和癌旁肺組織中富含半胱氨酸的酸性蛋白（secreted protein, acidic and rich in cysteine, SPARC)、轉化生長因子β1（transforming growth factorβ1, TGFβ1）、

2、Endoglin的表達，探討SPARC、TGFβ1、Endoglin因子在肺癌組織與癌旁肺組織中的表達及其與患者臨床病理特征的關系；探討SPARC、TGFβ1、Endoglin因子在肺癌組織中表達的相互關系及與新生血管之間關系。
　　收集54例人肺癌及2例癌旁肺組織標本，選擇其微血管形態(tài)不同的血管密集處制備組織芯片；在此基礎上采用免疫組化染色法分別進行CD34、Endoglin和α-SMA標記，觀察微血管管壁組成細胞的免疫表型與其

3、不同形態(tài)特征之間的關系，選擇出新生血管特異性標記物。
　　采用免疫組織化學技術和原位雜交技術方法檢測71例肺癌組織，30例癌旁肺組織中SPARC蛋白與SPARC mRNA、TGFβ1蛋白與TGFβ1 mRNA及Endoglin蛋白的表達情況；分析其與患者的臨床病理特征的關系以及三者之間表達的關系；分析檢測SPARC、TGFβ1、Endoglin表達的一致性。
　　SPARC蛋白、TGFβ1蛋白在71例肺癌組織中的陽性表達率分

4、別為56.34％(40/71)、60.56%(43/71)，30例癌旁肺組織中的陽性率分別為：20%(6/30)、30%(9/30)，Endoglin蛋白在肺癌中標記的MVD平均值是12.45±6.53，在癌旁組織中MVD平均值是0.31±0.46，肺癌組織中SPARC蛋白、TGFβ1蛋白、Endoglin蛋白的陽性表達率明顯高于癌旁組織中的表達率，差異顯著（P<0.05）。SPARC蛋白與肺癌的臨床分期與淋巴結轉移相關（P均＜0.05

5、），與患者的年齡、性別、腫瘤大小、分化程度及臨床分類無關（P均>0.05）。TGFβ1蛋白的表達與肺癌腫瘤大小、臨床分期、和淋巴結轉移相關（P均＜0.05），與患者的年齡、性別、腫瘤分化程度、臨床分類無關（P均>0.05）。Endoglin蛋白與肺癌的臨床分期及淋巴結轉移相關（P均＜0.05），與肺癌患者的年齡、性別、腫瘤大小、分化程度、臨床分類無關（P均>0.05）。SPARC蛋白和TGFβ1蛋白在肺癌組織中表達具有負相關性（r=-0

6、.246，P=0.039）。SPARC蛋白陽性表達增加時Endoglin標記的新生血管密度MVD逐漸減少，而TGFβ1蛋白陽性表達增加時MVD逐漸增加，SPARC、TGFβ1與MVD均有相關性（P<0.05）。
　　SPARC mRNA、TGFβ1 mRNA在71例肺癌組織中的陽性表達率分別為61.97%(44/71)、59.15%(42/71)，30例癌旁肺組織中的陽性率分別為：20%(6/30)、26.67%(8/30)，肺癌

7、組織中SPARC mRNA、TGFβ1 mRNA的陽性表達率明顯高于癌旁組織中的表達率，差異顯著（P<0.05）。SPARC mRNA在肺癌組織中的表達與臨床分期及淋巴結轉移相關（P均<0.05），與年齡、性別、腫瘤大小、分化程度及臨床分類無關（P均>0.05）。TGFβ1 mRNA在肺癌組織中的表達與肺癌的腫瘤大小、臨床分期及淋巴結轉移有關（P均<0.05），與肺癌患者的年齡、性別、腫瘤分化程度及臨床分類無關（P均>0.05）。SPA

8、RC mRNA和TGFβ1 mRNA在肺癌中的表達呈負相關性（r=-0.356， P=0.002）。肺癌組織中SPARC mRNA的高表達可以抑制肺癌的進展，而TGFβ1 mRNA的高表達可促進肺癌的進展，并參與肺癌的轉移過程。此二者在肺癌的發(fā)生、發(fā)展中可能起著重要的作用。
　　在71例肺癌組織中，SPARC蛋白陽性表達的40例標本中， SPARC mRNA陽性表達34例，陰性表達6例，SPARC蛋白陰性表達的31例標本中，SPA

9、RC mRNA陽性表達10例，陰性表達21例，經Spearman等級相關性分析可知SPARC蛋白與SPARC mRNA在肺癌中表達具有正相關性（r=0.539，P<0.01）。TGFβ1蛋白陽性表達的43例標本中，TGFβ1 mRNA陽性表達31例，陰性表達12例，TGFβ1蛋白陰性表達的28例標本中，TGFβ1 mRNA陽性表達11例，陰性表達17例，經 Spearman等級相關性分析可知 TGFβ1蛋白與TGFβ1 mRNA在肺癌中

10、表達具有正相關性（r=0.326，P<0.01）。說明免疫組化與原位雜交兩種方法具有高度的一致性。
　　(1)SPARC蛋白和SPARC mRNA、TGFβ1蛋白和TGFβ1 mRNA、Endoglin蛋白在肺癌組織中的陽性表達率顯著高于在癌旁肺組織中的陽性表達率，提示 SPARC、TGFβ1、Endoglin可能與肺癌的發(fā)生發(fā)展有關；(2)經免疫組化與原位雜交兩種方法檢測：SPARC與肺癌的臨床分期與淋巴結轉移相關， SPARC

11、在臨床分期早期（Ⅰ~Ⅱ），淋巴結無轉移時表達增加，而臨床分期越晚（Ⅲ~Ⅳ），淋巴結出現(xiàn)轉移時SPARC的表達越少，提示SPARC可能抑制肺癌的進展，隨著肺癌臨床分期與淋巴結出現(xiàn)轉移時，MVD逐漸增加，而相應的SPARC的表達卻在減少，在臨床早期、淋巴結無轉移時，SPARC表達增加， MVD卻在減少，二者有相關性，考慮SPARC在肺癌中的表達可能與抗腫瘤血管生成有關；(3)TGFβ1的表達與肺癌腫瘤大小、臨床分期、和淋巴結轉移相關，隨著肺

12、癌腫瘤體積增大、臨床分期的進展及淋巴結出現(xiàn)轉移時TGFβ1的表達逐漸增加，同時，隨著TGFβ1在肺癌中陽性表達增多，肺癌腫瘤新生血管數(shù)量也逐漸增多，經統(tǒng)計可知TGFβ1與MVD二者具有顯著相關性，TGFβ1的表達與肺癌的進展和新生血管生成相關；(4)等級相關分析顯示SPARC的表達與TGFβ1的表達具有負相關性，隨著Endoglin標記的新生血管密度增加時SPARC在肺癌的表達減少，而TGFβ1的表達卻在增加，提示肺癌新生血管可能與SP