營養(yǎng)性肥胖小鼠脂肪組織特異蛋白的篩選.pdf

1、目的：建立營養(yǎng)性肥胖小鼠模型，篩選營養(yǎng)性肥胖小鼠與正常小鼠在不同時間段脂肪組織特異蛋白。
　　 方法：50只C57BL/6J鼠，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，隨機分為高脂組與低脂組，分別以高脂飼料(58 kcal％ fat)及其對照低脂飼料(11 kcal％ fat)喂養(yǎng)14周。分別于0周，4周，14周取血、附睪脂肪組織，4周、11周、13周行IPGTT。采用蛋白雙向凝膠電泳技術(shù)分離4周、14周高脂組與低脂組脂肪組織總蛋白，PD-Quest

2、軟件分析電泳結(jié)果，選擇有顯著差異的蛋白點做串聯(lián)介質(zhì)輔助的激光解吸飛行時間質(zhì)譜(MALDI-TOF-TOF)分析。
　　 結(jié)果：高脂組與低脂組體重在1周末即產(chǎn)生顯著差異(p＜0.05)。4周時IPGTT0分，15分，30分，60分血糖差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)，高脂組與低脂組120分血糖差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)；高脂組與低脂組TG、TG、HDL-C、LDL-C、尿酸差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)；空腹靜脈血糖、胰島

3、素差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。11周時IPGTT120分血糖差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)；0分，15分，30分，60分高脂組與低脂組血糖差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。13周時IPGTT15分，30分，120分高脂組與低脂組血糖差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)；0分，60分高脂組與低脂組血糖差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。14周時高脂組與低脂組TC、TG、HDL-C、LDL-C、尿酸、空腹靜脈血糖差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.

4、05)；胰島素差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。二維電泳提示：14周高脂組與低脂組差異1.5倍以上的無，差異在1.2-1.5倍之間的有18個點，下調(diào)17個點，上調(diào)1個點。4周高脂組與低脂組差異1.5倍以上的10個點，上調(diào)1個，下調(diào)9個；差異在1.2-1.5倍之間的有26個點，下調(diào)25個，上調(diào)1個。我們選擇有顯著性差異的42個點用于質(zhì)譜分析。MALDI-TOF-TOF分析結(jié)果得到了16個可信蛋白。
　　 結(jié)論：生化等結(jié)果提示：所建

5、立的營養(yǎng)性肥胖小鼠模型成功，此模型具有肥胖及代謝綜合征表現(xiàn)。4周定位肥胖早期，僅存在血脂、糖耐量及尿酸的異常，無空腹血糖異常及胰島素抵抗。該模型僅施以單純的飲食因素，制作過程簡單可重復(fù)性高，制作周期短(僅13周)，與人類肥胖癥的發(fā)病過程發(fā)病機制相似，極好的模擬了肥胖早期及終末期的各個變化過程，是良好的動物模型，并為后續(xù)的研究打下堅實的基礎(chǔ)。通過二維電泳及MALDI-TOF-TOF鑒定出差異蛋白可能為肥胖早期特異蛋白標(biāo)記物及肥胖的保護因子