煙草赤星病生物學(xué)特性研究及同工酶技術(shù)在鏈格孢分類(lèi)中的應(yīng)用.pdf

1、本論文主要研究了各種環(huán)境因子和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)對(duì)煙草赤星病病原菌生長(zhǎng)和產(chǎn)孢量的影響，分析了10個(gè)赤星病菌株酯酶同工酶和可溶性蛋白的聚丙烯酰胺凝膠電泳圖譜，并對(duì)病原菌分泌的纖維素酶、多酚氧化酶、淀粉酶3種酶系活性變化進(jìn)行了測(cè)定。本論文的主要研究結(jié)果如下： 1.對(duì)分離自安徽省鳳陽(yáng)、渦陽(yáng)、固鎮(zhèn)等煙區(qū)的赤星病病原菌的生物學(xué)特性進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，該菌在10～35℃條件下均能生長(zhǎng)，最適生長(zhǎng)溫度為25～30℃，溫度低于7℃或高于40℃菌絲不能生長(zhǎng)

2、，分生孢子致死溫度是53℃5min和50℃10min。幼菌絲致死溫度是52℃5min和49℃10min。病原菌在pH4.0～11.0的范圍內(nèi)均能生長(zhǎng)，呈現(xiàn)雙峰曲線(xiàn)，即在pH6.0～pH8.0生長(zhǎng)較快，尤以pH6.0和pH8.0的條件下菌絲生長(zhǎng)更快。分生孢子在pH4.0～11.0之間均可以萌發(fā)，在pH6.0時(shí)，產(chǎn)孢量最高，在pH8.0時(shí)，菌絲生長(zhǎng)最快。該菌對(duì)多種單糖、雙糖和多糖等碳源及有機(jī)氮和無(wú)機(jī)氮均能夠利用。其中葡萄糖、麥芽糖、乳糖為最

3、佳碳源，產(chǎn)孢量以麥芽糖最高，液體培養(yǎng)結(jié)果顯示以果糖和乳糖為碳源的培養(yǎng)基更適合病原菌生長(zhǎng)；蛋白胨為最佳氮源，產(chǎn)孢量也是最高，液體培養(yǎng)結(jié)果顯示也是蛋白胨為氮源的培養(yǎng)基更適合病原菌生長(zhǎng)，菌絲干重值最大，脲和NH4Cl對(duì)病原菌的生長(zhǎng)則有一定的抑制作用。在光照和黑暗交替的條件下，更利于菌絲的生長(zhǎng)和產(chǎn)生孢子。 2.本文分析了10個(gè)煙草赤星病病原菌菌株酯酶同工酶和可溶性蛋白的聚丙烯酰胺凝膠電泳圖譜，并將同工酶酶譜資料進(jìn)行了聚類(lèi)分析?？扇苄缘鞍?/p>

4、電泳圖譜中酶帶較豐富，從可溶性蛋白電泳圖譜中可以看出種內(nèi)的菌種差異。酯酶電泳圖譜酶帶很少，比較單一.但也可以看出渦陽(yáng)地區(qū)的菌株酶的強(qiáng)度高于其他地區(qū)，這可能和菌株本身致病力相關(guān)?？扇苄缘鞍讏D譜中10株鏈格孢菌被明顯分成5組，也可以看出各個(gè)地區(qū)的菌株具有很強(qiáng)的相似性，而固鎮(zhèn)和渦陽(yáng)的菌株顯示的酶帶較多。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果還表明，同工酶電泳方法簡(jiǎn)單易行，能精確反映菌株之間的微小差異，適用于鏈格孢屬種內(nèi)分群，可作為傳統(tǒng)鏈格孢菌分類(lèi)的一個(gè)重要的輔助工具，克

5、服單一依據(jù)形態(tài)特征和生理生化指標(biāo)進(jìn)行分類(lèi)所存在的弊端。 3.在液體條件下對(duì)煙草赤星病病菌培養(yǎng)10d內(nèi)，分別系統(tǒng)測(cè)定纖維素酶、PPO、淀粉酶等3種酶的活性，試驗(yàn)結(jié)果表明：3種胞外酶活性隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)會(huì)逐漸的上升，培養(yǎng)后期有的菌株分泌的酶會(huì)呈下降趨勢(shì)，這可能和培養(yǎng)液的營(yíng)養(yǎng)條件有關(guān)。渦陽(yáng)地區(qū)的菌株分泌纖維素酶活性和PPO酶活性明顯高于其他地區(qū)的菌株，而鳳陽(yáng)地區(qū)的菌株分泌纖維素酶活性和PPO酶活一直都保持在很低的水平。而分泌淀粉酶活