香鱗毛蕨中抗菌及抗腫瘤活性成分的研究.pdf

1、香鱗毛蕨（Dryopteris fragrans（L.）schott）為多年生落葉草本，屬于鱗毛蕨科鱗毛蕨屬植物，生長于高寒地區(qū)的滑石坡、森林中的碎石坡和火山周圍的巖漿縫隙中。我國的東北、華北、俄羅斯、日本以及歐美均有分布。另據(jù)五大連池地方志記載，達(dá)斡爾族居民在幾百年前就已經(jīng)使用香鱗毛蕨水煎液治療多種疾病，尤其對(duì)皮膚病療效獨(dú)特，近年來對(duì)香鱗毛蕨藥理作用的研究中發(fā)現(xiàn)，其對(duì)多種腫瘤細(xì)胞具有明顯的抑制作用。
　　引起真菌性皮膚病的主要病

2、原菌為毛癬菌屬、小孢子菌屬以及表皮癬菌屬的真菌。斷發(fā)毛癬菌（Trichophyton tonsurans）屬于毛癬菌屬，是一種能夠感染人類的絲絨狀病原菌，主要引起兒童黑癬，還可引起甲癬、手足癬、體癬等。石膏樣小孢子菌（Microsporum gypseum）屬于小孢子菌屬，是親動(dòng)物性皮膚癬菌，可引起動(dòng)物黃癬樣病變，感染人可引起體癬、膿癬及白癬。
　　惡性腫瘤是當(dāng)前威脅人類健康和生命的最主要的疾病，而目前臨床上用于治療腫瘤的藥物大多

3、為毒副作用較大或易產(chǎn)生耐藥性的化學(xué)合成藥物，嚴(yán)重影響臨床療效，因此從天然藥物中尋求低毒、高效的新型抗腫瘤藥物，成為研究的重點(diǎn)。本文對(duì)香鱗毛蕨水提液進(jìn)行大孔樹脂柱色譜，用水、30％、60％、95％乙醇依次洗脫，再對(duì)各個(gè)組分進(jìn)行抗菌及抗腫瘤活性篩選。抗菌結(jié)果表明30％乙醇組分的抗菌效果最好，MIC分別為斷發(fā)毛癬菌:3.125-6.25 mg/mL，石膏樣小孢子菌:1.563-3.125 mg/mL; MFC分別為斷發(fā)毛癬菌:6.25-12.

4、5 mg/mL，石膏樣小孢子菌:3.125-6.25 mg/mL。抗腫瘤活性篩選結(jié)果表明各組分均有不同程度的抗人肺癌細(xì)胞A549和人乳腺癌細(xì)胞MCF-7活性，30％乙醇組分的效果最顯著，最終確定30％乙醇組分為抗菌及抗腫瘤有效部位。
　　利用正相硅膠柱色譜、反相(MCI、ODS、RP-18)柱色譜、Sephadex LH-20柱色譜、TLC等技術(shù)對(duì)30％乙醇組分進(jìn)行分離、純化，得到10個(gè)單體化合物，通過UV、IR、MS、NMR并結(jié)

5、合文獻(xiàn)報(bào)道確定其結(jié)構(gòu)，其中包括芳香類化合物4個(gè)、黃酮類化合物2個(gè)、倍半萜類化合物2個(gè)、木脂素類1個(gè)、甾醇類化合物1個(gè)。其中的新化合物1個(gè)，命名為:Dryofragranoside K。已知化合物9個(gè)，分別為:(Z)-3，5,5-trimethyl-4-(3-(3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)-tetrahydro-2H-pyran-2-yloxy)butylidene)cyclohex-2-enone

6、,(E)-3-(4-hydroxyphenyl)acryic acid,β-sitosterol,3,4-dihydroxy benzaldehyde,(6S,9R)-3-oxo-α-ionol-9-O-β-D-glucopyranoside,fragranosideA,7,9';7',9-diep-oxylignans pinoresinol-4,4'-di-O-β-D-galactoside,(7S,8R)-dihydrodehyd

7、rodiconiferyl alcohol-9-O-β-D-glucoside, quercetin-3-O-β-D-glucose。
　　通過對(duì)所分離得到的7個(gè)單體化合物的抗菌活性試驗(yàn)，結(jié)果表明香豆酸、松脂醇二半乳糖苷、(6S，9R)-3-α-紫羅蘭醇-9-O-β-D-吡喃葡萄糖苷具有抗斷發(fā)毛癬菌和石膏樣小孢子菌活性。
　　采用MTT法對(duì)分離得到的9個(gè)單體化合物進(jìn)行了抗腫瘤活性篩選，結(jié)果表明香鱗毛蕨苷A和香豆酸對(duì)A549細(xì)

8、胞具有明顯的抑制作用，24 h、48 h、72 h的IC50值分別為18.75±0.22μmol/L、11.03±0.15μmol/L、8.31±0.26μmol/L和32.78±0.13μmol/L、22.97±0.24μmol/L、22.74±0.18μmol/L;松脂醇二半乳糖苷、香鱗毛蕨苷K和槲皮素-3-O-β-D葡萄糖對(duì)MCF-7細(xì)胞具有明顯的抑制作用，24 h、48 h、72h的IC50值分別為17.58±0.13μmol/

9、L、9.52±0.11μmol/L、6.27±0.21μmol/L和27.38±0.12μmol/L、21.50±0.18μmol/L、15.97±0.25μmol/L和30.50±0.15μmol/L、26.46±0.20μmol/L、20.78±0.28μmol/L，均表現(xiàn)出一定的時(shí)間與濃度依賴性。
　　本文對(duì)香鱗毛蕨抗斷發(fā)毛癬菌和石膏樣小孢子菌以及抗腫瘤活性組分進(jìn)行了研究，并對(duì)得到的單體化合物進(jìn)行了抗菌和抗腫瘤活性篩選，最終