S100A4、MMP-2及TIMP-2在結直腸癌組織中的表達及意義.pdf

1、目的：侵襲和轉移是惡性腫瘤的兩個重要生物學特性，是一個極其復雜的多因素、多步驟過程。該過程受瘤細胞之間的粘附作用、對周圍細胞外基質蛋白的降解能力以及瘤細胞遷移等因素影響。S100A4蛋白是一種鈣離子結合蛋白，通過鈣離子信號轉導途徑在細胞內基因表達、細胞增殖分化、細胞粘附運動、降解和重塑細胞外基質及細胞凋亡中發(fā)揮重要作用。MMP-2是基質金屬蛋白酶家族成員之一，能夠降解細胞外基質和基底膜，促進腫瘤細胞向周圍組織擴散，從而對腫瘤的侵襲和轉移

2、產生影響。TIMP-2是已知的4種金屬蛋白酶組織抑制劑之一，可以1：1的非共價鍵形式與MMP-2結合，特異性抑制MMP-2活性，MMP-2：TIMP-2比例失調可導致細胞外基質和基底膜降解，是腫瘤侵襲和轉移的關鍵步驟之一。 結直腸癌是臨床常見的惡性腫瘤之一，國內外學者對影響結直腸癌侵襲和轉移的相關因素的研究日益深入。本研究擬采用免疫組化鏈霉素抗生物素蛋白一過氧化物酶法(Streptavidin Peroxidase，S-P法)在

3、蛋白水平聯(lián)合檢測結直腸癌中S100A4、MMP-2和TIMP-2的表達情況，分析其表達與結直腸癌生物學行為之間的關系，探討利用S100A4、MMP-2和TIMP-2作為分子標記物評估腫瘤侵襲和轉移潛能的可能性，為進一步開展結直腸癌的研究和臨床治療提供病理學依據。 方法：本研究選擇臨沂市人民醫(yī)院2004年1月～2005年1月期間行手術切除并經病理診斷確診的結直腸癌患者68例，收集病理標本的存檔蠟塊，同時選取20例正常結直腸粘膜組織

4、作為對照。每個蠟塊進行連續(xù)切片4張，厚5μm。其中一張切片進行HE染色，常規(guī)病理觀察，另三張切片應用免疫組織化學方法(S—P法)進行S100A4、MMP-2和TIMP-2表達水平檢測。分析S100A4、MMP-2和TIMP-2在結直腸癌組織與正常結直腸粘膜組織中表達的差異，與結直腸癌患者年齡、性別、腫瘤部位、大體類型、組織學類型、分化程度、Dukes分期及淋巴結轉移的關系。實驗資料應用SPSS 13.0 for windows統(tǒng)計軟件包

5、對實驗結果進行X<'2>檢驗、Kruskal-Wallis秩和檢驗、Spearman等級相關分析。 結果：1.S100A4蛋白在20例正常結直腸粘膜組織中未見陽性表達(0﹪)，在68例癌組織中有42例(61.8﹪)呈陽性表達，其中弱陽性18例(26.5﹪)、陽性15例(22.1﹪)、強陽性9例(13.2﹪)，兩者統(tǒng)計學差異顯著(P=0.003)；S100A4蛋白的表達在結直腸癌不同年齡、性別、腫瘤部位、大體類型、組織學類型、分化

6、程度中差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；在不同Dukes分期及淋巴結轉移中差異明顯(P<0.05)，且分期越晚、發(fā)生淋巴結轉移者表達越高。2.MMP-2在20例正常結直腸粘膜組織中有4例(20﹪)呈陽性表達，在68例癌組織中有58例(85.3﹪)呈陽性表達，其中弱陽性20例(29.4﹪)、陽性27例(39.7﹪)、強陽性11例(16.2﹪)，兩者統(tǒng)計學差異顯著(P=0.001)：MMP-2的表達在結直腸癌不同年齡、性別、腫瘤部位、大體

7、類型、組織學類型中差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；在不同分化程度、Dukes分期及淋巴結轉中差異明顯p<0.05)，且分化越差、分期越晚、發(fā)生淋巴結轉移者表達越高。3.TIMP-2在20例正常結直腸粘膜組織中有8例(40﹪)呈陽性表達，在68例癌組織中有40例(58.8﹪)呈陽性表達，其中弱陽性15例(22.1﹪)、陽性19例(27.9﹪)、強陽性6例(8.8﹪)，兩者差異無統(tǒng)計學意義(P=0.609)，但TIMP-2中一強度表達在

8、兩者中差異顯著(P<0.05)。TIMP-2的表達在結直腸癌不同年齡、性別、腫瘤部位、大體類型、組織學類型、分化程度中差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；在不同Dukes分期及淋巴結轉移差異明顯(P<0.05)，且分期越晚、發(fā)生淋巴結轉移者表達降低。4.統(tǒng)計學分析表明，結直腸癌中S100A4蛋白與MMP-2表達呈正相關(r=0532,P<0.01)，MMP-2與TIMP-2表達呈負相關(r=-0.425,P<0.01)，S100A4蛋白

9、與TIMP-2表達無相關(r=0.095,P>0.05)。 結論：1.S100A4蛋白在正常結直腸粘膜組織中無表達，在結直腸癌組織中有不同程度的表達；MMP-2在結直腸癌組織中的表達明顯高于正常結直腸粘膜；TIMP-2在癌組織和正常結直腸粘膜組織中均有不同程度的陽性表達;但中一強度表達前者明顯高于后者。2.結直腸癌中S100A4蛋白、MMP-2及TIMP-2表達在不同Dukes分期和淋巴結轉移中差異明顯，且分期越晚、發(fā)生淋巴結轉

10、移者S100A4蛋白與MMP-2表達越高，而TIMP-2表達呈降低趨勢。S100A4蛋白和MMP-2高表達與TIMP-2低表達在結直腸癌的侵襲和轉移中可能有一定協(xié)同作用。3．結直腸癌中S100A4蛋白與MMP-2的表達呈正相關，MMP-2與TIMP-2表達呈負相關，S100A4蛋白可能參與介導了MMP-2的表達，TIMP-2則可能反饋性抑制了MMP-2的表達。4．應用免疫組化S-P法聯(lián)合檢測S100A4，MMP-2，TIMP-2表達情況