MMP-9、MMP-2、TIMP-1及TIMP-2在創(chuàng)傷性顱腦損傷患者中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：創(chuàng)傷性顱腦損傷（Traumatic brain injury）在西方國(guó)家早就引起人們的注意，它的致死和致殘的非常高。改革開(kāi)放以后這些年，我國(guó)的經(jīng)濟(jì)的如火箭升天般一樣直速上升，汽車(chē)的普遍，高速公路的提速等，我國(guó)顱腦傷發(fā)生率和因顱腦傷致死致殘的傷員也逐年增加。因此越來(lái)越多的學(xué)者開(kāi)始關(guān)注并研究它。創(chuàng)傷性顱腦損傷遺留的偏癱，智力障礙等重大殘疾,給社會(huì)和家庭帶來(lái)沉重負(fù)擔(dān)，腦損傷后的直接結(jié)果是形成腦水腫,隨著腦水腫的進(jìn)行性加重,顱內(nèi)壓增高,常

2、導(dǎo)致腦病而死亡,且死亡率非常高，隨著相關(guān)研究的進(jìn)一步深入,認(rèn)識(shí)到腦損傷中血腦屏障(BBB)的損害在腦水腫的形成中起十分明顯的作用,而血腦屏障損害的實(shí)質(zhì)是一種膜系統(tǒng)受損的結(jié)果,對(duì)血腦屏障的超微結(jié)構(gòu)研究發(fā)現(xiàn),BBB由三層結(jié)構(gòu)組成:腦毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞及其緊密連接而形成的基膜和膠質(zhì)細(xì)胞足突，腦損傷再灌注的損害亦表現(xiàn)為這三種結(jié)構(gòu)的破壞,從而改變其通透性致腦水腫的發(fā)生，基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPS)是一個(gè)比較大的蛋白酶家族,主要分解細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)

3、,機(jī)體同時(shí)存在金屬蛋白酶的組織抑制物(TIMPS),MMPS與TIMPS之間保持相對(duì)的特異性和功能上的動(dòng)態(tài)平衡，在各種病理?xiàng)l件下打破了這種平衡,就會(huì)導(dǎo)致過(guò)分的細(xì)胞外基質(zhì)分解,產(chǎn)生相應(yīng)的病理?yè)p害。
　　因此通過(guò)檢測(cè)并分析腦外傷后的患者腦脊液及血液中MMP-9、MMP-2、TIMP-1及TIMP-2的表達(dá)與正常對(duì)照組中它們的表達(dá)的差異性，從而來(lái)探討TBI患者的腦脊液及血液中MMP-9、MMP-2、TIMP-1及TIMP-2的表達(dá)水平與

4、TBI患者的的嚴(yán)重程度以及臨床預(yù)后等之間的關(guān)系。
　　方法：收集2012年1月～2012年10月期間河北大學(xué)附屬醫(yī)院神經(jīng)外科診斷為T(mén)BI患者30例,30例患者按（Glasgow≤8分為重度組，>8分的為輕度組）分為兩組，全部TBI患者于發(fā)病24小時(shí)內(nèi)入院,分別留取24h,72h和120h之內(nèi)腦脊液及靜脈血，30例TBI患者測(cè)定MMP-9、MMP-2、TIMP-1及TIMP-2，對(duì)照組于采集時(shí)分別留取靜脈血及腦脊液各5ml左右,血液

5、標(biāo)本（腦脊液標(biāo)本中為血性腦脊液的）靜置30分鐘使血液凝集，其余標(biāo)本可直接檢驗(yàn),室溫1000Xg離心10分鐘,吸取上清液(血清),立即置于-70℃，冰箱保存待測(cè)，TBI患者分別分為觀察組輕重兩組,同時(shí)選取10例對(duì)照組（標(biāo)本為檢驗(yàn)科贈(zèng)送,腦脊液標(biāo)本為排除內(nèi)科顱內(nèi)疾病時(shí)篩選的正常腦脊液，均經(jīng)檢測(cè)為正常，血液標(biāo)本為健康體檢時(shí)所采集的標(biāo)本）,所有采集標(biāo)本用雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)觀察因子。
　　結(jié)果：本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)到MMP-9在TBI患者組腦

6、脊液中24小時(shí)內(nèi)達(dá)到高峰，最少可以持續(xù)72小時(shí)，統(tǒng)計(jì)學(xué)顯示，24小時(shí)內(nèi)與72小時(shí)內(nèi)無(wú)顯著性差別，但是與120小時(shí)內(nèi)的檢測(cè)有顯著性差別。TIMP-1在120小時(shí)內(nèi)可達(dá)高峰，相對(duì)第72小時(shí)內(nèi)，第24小時(shí)內(nèi)有顯著性差異。MMP-2及TIMP-2在TBI患者的腦脊液中120小時(shí)內(nèi)無(wú)明顯變化。在血液中各檢測(cè)因子隨時(shí)間無(wú)明顯變化，TBI患者與對(duì)照組的MMP-9、MMP-2、TIMP-1及TIMP-2無(wú)論CST還是血液中的表達(dá)都有顯著性差異.重度TB

7、I患者組的MMP-9在腦脊液水平顯著高于輕度TBI患者組。然而MMP-2、TIMP-1及TIMP-2在腦脊液中的表達(dá)在重度與輕度組之間無(wú)顯著性差異。在血液標(biāo)本檢測(cè)中MMP-9、MMP-2、TIMP-1及TIMP-2的表達(dá)在重度與輕度組之間無(wú)顯著性差異。對(duì)所有的TBI患者組受傷后MMP-9（120小時(shí)）含量與TIMP-1（120小時(shí)）含量進(jìn)行簡(jiǎn)單相關(guān)性分析，結(jié)果顯示，兩者之間有直線相關(guān)關(guān)系，呈負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)-0.593（P<0.01），

8、MMP-2與TIMP-2之間在各檢測(cè)點(diǎn)保持相關(guān)性。
　　結(jié)論：本課題在TBI不同分級(jí)患者及正常腦組織中檢測(cè)并分析了MMP-9、MMP-2、TIMP-1及TIMP-2的表達(dá)水平。研究發(fā)現(xiàn)如下：
　　1.TBI患者與對(duì)照組的MMP-9、MMP-2、TIMP-1及TIMP-2無(wú)論腦脊液還是血液中的表達(dá)都有顯著性差異。MMP-9在TBI患者組腦脊液中24小時(shí)內(nèi)達(dá)到高峰，最少可以持續(xù)72小時(shí)。對(duì)TBI患者來(lái)說(shuō)，MMP-9的主要來(lái)源可能