巴戟天提取物對環(huán)磷酰胺所致成年雄性大鼠睪丸損傷的改善作用.pdf

1、目的：探討巴戟天提取物對環(huán)磷酰胺所致的成年雄性SD大鼠睪丸損傷的改善作用。
　　方法：56只健康成年雄性SD大鼠隨機(jī)分為空白對照組、CTX模型組、CTX+NS組、巴戟天提取物10g/kg組、巴戟天提取物20g/kg組、巴戟天提取物30g/kg組、巴戟天提取物40g/kg組。灌胃治療2周，觀察各組大鼠體重，睪丸指數(shù)和附睪指數(shù)，HE染色光鏡下觀察睪丸組織，免疫組化法觀察Sertoli細(xì)胞中FSHR的定位，實(shí)時熒光定量PCR測量睪丸組織

2、中FSHR mRNA和ABP mRNA的表達(dá)水平,Western blot法檢測FSHR蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：⑴大鼠灌胃治療后，CTX模型組與空白對照組比較體重差異無統(tǒng)計學(xué)意義；CTX+NS組、巴戟天提取物10g/kg組、20g/kg組、30g/kg組、40g/kg組與空白對照組和CTX模型組之間比較，體重顯著降低（P＜0.05）；巴戟天提取物10g/kg組、20g/kg組、30g/kg組、40g/kg組與CTX+NS組之間比較

3、，體重差異無統(tǒng)計學(xué)意義。⑵睪丸指數(shù)：CTX模型組與空白對照組比較，睪丸指數(shù)低于空白對照組（P＜0.05）；巴戟天提取物20g/kg組、30g/kg組、40g/kg組與CTX+NS組比較，睪丸指數(shù)顯著升高（P＜0.05）。附睪指數(shù)：巴戟天提取物10g/kg組、20g/kg組、30g/kg組、40g/kg組與CTX+NS組比較，附睪指數(shù)差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。⑶睪丸形態(tài)學(xué)觀察：CTX模型組和CTX+NS組，可見生精小管上皮變薄，管

4、腔內(nèi)生精細(xì)胞層次紊亂，各級生精細(xì)胞明顯減少，分布稀疏，管腔不易見精子細(xì)胞和精子，可見脫落壞死的細(xì)胞；巴戟天提取物10g/kg組，可見大部分生精小管的結(jié)構(gòu)明顯改善，管腔內(nèi)生精細(xì)胞層次分明，各級生精細(xì)胞數(shù)量增多，排列緊密，大部分管腔可見較多精子,但仍有部分生精小管內(nèi)生精細(xì)胞層次紊亂，生精細(xì)胞減少，不易見精子細(xì)胞和精子；巴戟天提取物20g/kg組、30g/kg組、40g/kg組，生精小管結(jié)構(gòu)基本正常，生精上皮可見明顯增厚，管腔內(nèi)生精細(xì)胞層次明

5、顯，各級生精細(xì)胞數(shù)量增多、排列緊密，管腔精子較多。⑷免疫組織化學(xué):免疫組織化學(xué)反應(yīng)結(jié)果顯示FSHR在各組的大鼠睪丸組織中均有表達(dá)，陽性染色主要定位于睪丸生精小管中周圍的Sertoli細(xì)胞。⑸Realtime-PCR檢測FSHR mRNA結(jié)果顯示：巴戟天提取物10g/kg、20g/kg、30g/kg組和40g/kg組與CTX+NS組比較，F(xiàn)SHR mRNA表達(dá)顯著升高，具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）,巴戟天提取物30g/kg組FSHR m

6、RNA表達(dá)最高。⑹Realtime-PCR檢測ABP mRNA結(jié)果顯示：巴戟天提取物10g/kg、20g/kg、30g/kg組和40g/kg組與CTX+NS組比較，ABP mRNA表達(dá)顯著升高，具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），且隨著巴戟天提取物濃度的增高，ABP mRNA表達(dá)也升高，在40g/kg組ABP mRNA表達(dá)最高。⑺Western-bolt檢測FSHR蛋白表達(dá)顯示：巴戟天提取物10g/kg、20g/kg、30g/kg組和40g

7、/kg組與CTX+NS組比較，F(xiàn)SHR蛋白表達(dá)顯著升高，具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），巴戟天提取物30g/kg組FSHR蛋白表達(dá)最高。
　　結(jié)論：①成功使用環(huán)磷酰胺腹腔注射成年雄性SD大鼠構(gòu)建生精功能障礙的模型。②巴戟天提取物對雄性大鼠損傷的睪丸生精功能具有修復(fù)作用。③巴戟天提取物提高Sertoli細(xì)胞上的FSHR mRNA和FSHR蛋白的表達(dá)水平。④巴戟天提取物可促進(jìn)Sertoli細(xì)胞合成和分泌的ABP。⑤巴戟天提取物通過提高